[发明专利]一种从发酵液中分离提取四氢嘧啶的方法

摘要

本发明提供一种从发酵液中分离提取四氢嘧啶的方法，克服现有生产工艺中存在的工艺路线复杂，分离纯化困难，能耗水耗较多等问题。本发明从富含四氢嘧啶的发酵液中分离提取四氢嘧啶，首先利用双膜系统即微滤膜、超滤膜分离系统过滤去除发酵液中的菌体、大部分蛋白和部分色素，然后利用阳离子交换树脂吸附四氢嘧啶，再用氨水将四氢嘧啶洗脱后，经过活性炭脱色、浓缩醇沉、重结晶、干燥成品等操作步骤得到四氢嘧啶晶体。

主权项

1.一种从发酵液中分离提取四氢嘧啶的方法，包括如下步骤：a、取富含四氢嘧啶的发酵液，用盐酸调节pH为3.0‑6.0后泵入微滤膜分离系统，收集过滤液，当过滤液中四氢嘧啶浓度低于1.0g/L时停止收集，得到除去菌体的四氢嘧啶微滤液；b、将a步获得的微滤液泵入超滤膜分离系统，对微滤液进行除蛋白和脱色处理，收集过滤液，当过滤液中四氢嘧啶浓度低于1.0g/L时停止收集，得到除去蛋白和色素的四氢嘧啶超滤液；c、将b步获得的超滤液泵入离子交换柱，经阳离子交换树脂吸附，进样流速为1BV/h，吸附饱和后采用0.02‑0.2mol/L的氨水洗脱，洗脱流速为0.05‑2BV/h，收集pH=7‑12的四氢嘧啶高流分洗脱液；d、将c步获得的高流分洗脱液加入0.05%‑5% m/v 的活性炭脱色，温度20‑40℃，搅拌脱色10‑30 min，过滤获得四氢嘧啶脱色液；e、将d步获得的脱色液减压浓缩至原体积的5%‑15%，加入乙醇沉淀获得四氢嘧啶粗品；f、将e步获得的四氢嘧啶粗品重新溶解于去离子水至饱和，4℃下静置结晶后过滤获得晶体，60℃干燥后得到四氢嘧啶成品。