[发明专利]利用实时荧光定量PCR技术获取多糖类中药对家禽免疫功能增强作用中间信息的方法在审
| 申请号： | 201610028875.1 | 申请日： | 2016-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN105543371A | 公开（公告）日： | 2016-05-04 |
| 发明（设计）人： | 王光锋;李舫;靖吉强;王传春;王彩霞;袁东芳 | 申请（专利权）人： | 山东畜牧兽医职业学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 261061 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 利用实时荧光定量PCR技术获取多糖类中药对家禽免疫功能增强作用中间信息的方法，包括如下步骤：提取动物血液样品的基因组RNA；基因组RNA反转录为cDNA；在荧光定量PCR反应体系中分别加入β-actin引物、IL-2引物、cDNA以及荧光染料反应液，混匀，进行PCR扩增；根据荧光实时定量PCR专用仪对结果进行分析，根据IL-2基因和β-actin的Ct值，通过相对Ct法即2–ΔΔCt法，来计算IL-2基因mRNA的相对表达量。本发明操作简单，得到的IL-2基因mRNA的相对表达量为多糖类中药对家禽免疫功能增强作用的中间信息，能够辅助评价多糖类中药对家禽免疫功能增强作用。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 实时 荧光 定量 pcr 技术 获取 多糖 中药 家禽 免疫 功能 增强 作用 中间 信息 | ||
【主权项】：
利用实时荧光定量PCR技术获取多糖类中药对家禽免疫功能增强作用中间信息的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)提取家禽血液样品的基因组RNA；(2)将步骤(1)所得的基因组RNA反转录为cDNA；(3)在荧光定量PCR反应体系中分别加入β‑actin引物、IL‑2引物(即白介素‑2引物)、步骤(2)得到的cDNA以及荧光染料反应液，混匀，进行PCR扩增；(4)PCR扩增结束后，根据荧光实时定量PCR专用仪对结果进行分析，根据IL‑2基因和β‑actin的Ct值，通过相对Ct法即2–ΔΔCt法，来计算IL‑2基因mRNA的相对表达量。
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