[发明专利]一种高抗氧化性蛋白肽及其制备方法与应用

摘要

本发明属于水产加工及综合利用领域，特别涉及一种高抗氧化性蛋白肽及其制备方法与应用。发明对蟹加工下脚料脱脂干燥后利用碱性蛋白酶和中性蛋白酶分别对蟹加工下脚料进行处理，然后离心分离，得到上清液，上清液经超滤和凝胶色谱过滤，得到分子量为1000～5000的多肽溶液，然后浓缩干燥，得到高抗氧化性蛋白肽，制备方法简单，成本低，适合工业化生产。本发明制备得到的高抗氧化性蛋白肽的DPPH自由基清除率和超氧阴离子清除率分别达到23.5～27.5％、21.2～24.8％，抗氧化活性高，推广利用的价值高。

主权项

1.一种高抗氧化性蛋白肽的制备方法，其特征在于包含如下步骤：（1）预处理将破碎过筛后的蟹加工下脚料与异丙醇混合均匀后回流加热脱脂，清洗并干燥脱脂后的蟹加工下脚料，得到蟹粉；（2）蛋白酶水解处理取步骤（1）制得的蟹粉与水混匀后加热至50～62℃，调整反应体系pH值为8.2～9.0，然后加入碱性蛋白酶，50～62℃酶解1.5～2.5 h；酶解结束后将反应体系加热到85～100℃，保温10～15 min，使碱性蛋白酶失活；将反应体系冷却到45～60℃，并调整反应体系pH值为6.5～7.5，然后加入中性蛋白酶，45～60℃酶解1.5～2.5 h；酶解结束后将反应体系加热到85～100℃，保温10～15 min，使酶失活；然后离心分离，得到上清液；（3）超滤将步骤（2）制得的上清液加热到40～50℃，然后超滤分离，分离得到分子量小于10kDa的多肽溶液；（4）凝胶色谱过滤将步骤（3）超滤得到的多肽溶液过凝胶色谱Sephadex G‑25M柱，收集得到分子量为1000～5000的多肽分子的溶液；（5）浓缩及干燥将步骤（4）收集的溶液经浓缩，然后干燥，得到干态多肽物质，即为高抗氧化性蛋白肽；步骤（1）中所述的蟹加工下脚料与异丙醇的质量比为10：（10～30）；步骤（1）中所述的回流加热的条件为：温度为50～75℃，时间为20～35 min。