[发明专利]一种能抑制黑色素瘤的羊栖菜提取物

摘要

本发明涉及到一种能抑制黑色素瘤的羊栖菜提取物，其特征在于制备方法如下：羊栖菜烘干后粉碎成粉末，加入到微波超声波组合萃取仪中进行萃取，对萃取液进行抽滤，取滤液浓缩后，加入无水乙醇，静置，过滤取滤液，浓缩，再次加入无水乙醇，静置、离心，取沉淀物，真空干燥后溶于水中，配成工作液，与Sevage试剂混合，振摇、离心，取上清液；在阴离子交换纤维柱中对上清液进行吸附洗脱，见峰收集；然后在切向流超滤膜下膜浓缩脱盐，真空冷冻干燥，即得到能抑制黑色素细胞瘤的羊栖菜提取物。本发明所提供的羊栖菜提取物能够有效抑制黑色素瘤的增殖，诱导其凋亡，降低黑色素的含量，且副作用小，治疗黑色素瘤提供了一种新的途径和手段。

主权项

一种能抑制黑色素瘤的羊栖菜提取物，其特征在于制备方法如下：将新鲜的羊栖菜洗净后在40‑50℃下烘干3.5‑5小时，然后粉碎成粒度≤60目的羊栖菜粉末；向微波超声波组合萃取仪中加入羊栖菜粉末和蒸馏水，微波超声时间为8‑12min，温度45‑55℃、固液比1:8‑12g/mL、超声功率550‑650W、微波功率350‑450W；抽滤后取滤液，45‑55℃下浓缩至原体积的十分之一，加入无水乙醇使含醇量达30‑40％，静置24h，过滤取滤液，45‑55℃下浓缩至原体积的五分之一，加入无水乙醇使含醇量达到80％，静置24h，在10000‑14000rpm下离心12‑18min，取沉淀物；将沉淀物在‑0.08～‑0.1MPa下真空干燥，温度为28‑32℃，时间10‑14h；将干燥后的沉淀物溶于水中，配成浓度为4‑6wt％的水溶液作为工作液，将工作液与Sevage试剂按1:2混合，振摇13‑17min，3500‑4500rpm下离心4‑6min，取上清液；其中Sevage有机试剂为氯仿：正丁醇＝4:1(v/v)的混合物；将得到的上清液在DEAE‑52阴离子交换纤维柱进行吸附洗脱，洗脱条件为：缓冲体系为pH值7.2‑7.4的磷酸盐缓冲液，用含0‑2M的NaCl溶液等梯度洗脱DEAE‑52阴离子交换纤维柱，流速为1mL/min，在波长为215nm下监测洗脱液中提取物含量，见峰收集；收集0.5M～1.0M NaCl下的洗脱液，然后在3.5KD切向流超滤膜下膜浓缩脱盐至原体积的五分之一，真空冷冻干燥，真空度130Pa，温度为‑80℃，时间为48h；即得到能抑制黑色素细胞瘤的羊栖菜提取物。