[发明专利]一种基因定位整合表达系统及其应用

摘要

本发明涉及一种基因定位整合表达系统及其应用。具体地，涉及一种核酸构建物在转基因羊基因组中特定位点的整合与高效表达，所述核酸构建物包含与所述染色体区域结合的同源臂序列，以及位点特异性重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒。将所述构建物导入宿主细胞，可以实现目的基因在宿主细胞基因组中的定位整合与表达，获得转基因细胞，并以转基因细胞为核供体获得表达目的基因的转基因羊。利用位点特异性重组技术，可以在所述转基因羊体细胞中，实现其它特定外源基因的表达及转基因的遗传修饰。

主权项

一种核酸构建物，其特征在于，所述的构建物具有从5到3’的式I结构：A5‑B5‑C‑B3‑A3‑D  (I)式中，A5、B5、C、B3、A3、D分别为用于构成所述构建物的元件；各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列；A5为5’同源臂序列；B5为5’位点特异性重组序列；C为串联的、各自独立的外源基因表达盒和第一筛选标记基因的表达盒；B3为3’位点特异性重组序列；A3为3’同源臂序列；D为无或第二筛选标记基因的表达盒；并且，所述的5’同源臂序列和3’同源臂序列使得所述构建物与山羊染色体发生定点重组，且所述的定点重组的位点位于山羊5号染色体MICAL3和PEX26之间的区域(NC_022297.1第100383471‑100500925位)。