[发明专利]浒苔多糖在制备畜禽免疫增强剂中的用途

摘要

本发明涉及浒苔多糖在制备畜禽免疫增强剂中的用途，所述的浒苔多糖由以下步骤制得：(1)新鲜浒苔，清洗干净，晾干；(2)将浒苔研磨至粉末，100℃煮沸2‑3h，重复4次；(3)合并滤液，加入乙醇，4℃过夜，4000r/min，离心；(4)取沉淀，溶解于超纯水中；(5)sevage法除蛋白；(6)加入3‑4倍量95％乙醇，4℃过夜，4000r/min，离心30‑35min；(7)取沉淀，除脂，得浒苔多糖，冷冻保持；(8)取浒苔多糖溶解于超纯水中，过滤除菌，即得。本发明解决浒苔污染环境问题，是变废为宝利国利民的事情；而且可以减少畜禽传染病的发生，生产绿色安全的畜禽产品。

主权项

浒苔多糖在制备畜禽免疫增强剂中的用途，其特征在于：所述的浒苔多糖应用在制备畜禽免疫增强剂中；所述的浒苔多糖的剂型为注射剂；所述的浒苔多糖的注射剂由以下步骤制得：(1)新鲜浒苔，清洗干净，晾干；(2)将浒苔研磨至粉末，按照料液比100g：300‑ml，或按照料液比100g：400ml，或按照料液比100g：500ml加超纯水，100℃煮沸2‑3h，重复4次；(3)合并滤液，加入3‑4倍量95％乙醇，4℃过夜，4000r/min，离心30‑35min；(4)取沉淀，溶解于超纯水中，沉淀与超纯水比例为1g：80ml，或沉淀与超纯水比例为1g：100ml，或沉淀与超纯水比例为1g：120ml；(5)sevage法除蛋白，取上清，重复3‑4次；(6)加入3‑4倍量95％乙醇，4℃过夜，4000r/min，离心30‑35min；(7)取沉淀，沉淀加加10倍量无水乙醇，浸泡30min后弃去液体；加入10倍量丙酮浸泡30min后弃去液体；加入10倍量乙醚浸泡30min后弃去液体除脂得浒苔多糖，冷冻保持；(8)取浒苔多糖溶解于超纯水中，过滤除菌，即得浒苔多糖注射剂；所述的浒苔多糖单独使用或者和其他疫苗一起使用；还包括免疫实验方法：(1)试验设计与分组；1日龄白羽肉公鸡养至14日龄，随机分为6组，1、2、3、4、5、6组，每组30只；1、2、3组为实验组，4组为疫苗对照组，5组为空白对照组，6组为多糖对照组；1组每只鸡注射0.1g/kg浒苔多糖，2组每只鸡注射0.2g/kg浒苔多糖，3组每只鸡注射0.3g/kg浒苔多糖，6组每只鸡注射0.2g/kg浒苔多糖作为多糖对照组；1、2、3、4组每只鸡颈部皮下注射新城疫LaSota弱毒疫苗，1羽份/只，5组对照组注射等量生理盐水，6组不接种疫苗；(2)鸡新城疫HI抗体滴度的测定；于免疫后3、7、11、14、21翼下静脉采血0.5mL，3000r/min离心5min分离血清，用微量血凝抑制法测定鸡新城疫HI抗体滴度；(3)数据处理；利用SPSS Statistics 19.0统计分析软件进行数据分析，多重比较用LSD法进行，试验数据用用平均值+标准差并进行显著性比较。