[发明专利]一种高通量检测液态乳制品中脂肪酶酶活性的方法及其试剂盒

摘要

本发明公开了一种高通量检测液态乳制品中脂肪酶酶活性的方法及其试剂盒。本发明提供的检测液态乳制品中脂肪酶酶活性的试剂盒，包括独立包装的试剂1和试剂2；所述试剂1为甘氨酸‑氢氧化钠缓冲液，所述试剂1的pH值为8.0～10.0；所述试剂2为对硝基苯酯的乙腈溶液。本发明提供了利用所述试剂盒检测液态乳制品中脂肪酶酶活性的方法，为原料乳的分级提供了理论依据，同时可以制定适于生产加工各种液态奶的生鲜乳质量控制指标，如预测UHT乳货架期，科学指导UHT产品的分区销售，降低因残留脂肪酶酶活导致产品变质、维护企业利益和消费者健康等。本发明检测方法灵敏度高，脂肪酶的检测阈值低。

主权项

1.一种液态乳制品中脂肪酶酶活性的检测方法，包括如下步骤：(1)配制至少5种标准液态乳制品，空白对照以蒸馏水或去离子水代替液态乳制品；(2)将所述标准液态乳制品分别与试剂1于酶标板中进行混合并孵育；所述酶标板为96孔酶标板；(3)向所述标准液态乳制品与所述试剂1的混合液中加入试剂2，进行反应；所述反应结束后加入终止液进行终止反应；检测所述终止反应后的体系在发射波长为400～420nm下的吸光值，其中所述空白对照品的吸光值计为A空白，脂肪酶的酶活不为零的所述标准液态乳制品的吸光值计为A标准，以所述标准液态乳制品的脂肪酶的酶活为横坐标，以A标准与A空白的差值作为纵坐标，制作标准曲线；(4)将待测液态乳制品与所述试剂1进行混合并孵育，然后重复步骤(3)，得到体系在发射波长为400～420nm下的吸光值A样品；根据所述标准曲线和A样品，即得到待测液态乳制品中脂肪酶的酶活性；所述酶活性的单位定义为：脂肪酶水解对硝基苯酯，每分钟释放1μmol对硝基苯酚的酶量，表示为U/mL；所述试剂1为甘氨酸‑氢氧化钠缓冲液，所述试剂1的pH值为8.0～10.0；所述试剂2为对硝基苯棕榈酸酯的乙腈溶液；所述终止液为乳品澄清剂。