[发明专利]一种绿色木霉突变株的培养方法在审
申请号: | 201610049069.2 | 申请日: | 2016-01-26 |
公开(公告)号: | CN105713894A | 公开(公告)日: | 2016-06-29 |
发明(设计)人: | 李晓白;蒋立科 | 申请(专利权)人: | 李晓白 |
主分类号: | C12N15/01 | 分类号: | C12N15/01;C12N1/14;C12R1/885 |
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地址: | 230088 安徽省合*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种绿色木霉突变株的培养方法,包括:先从野外植物腐烂残体的水溶液取样,于26℃接种于PDA固体培养基上培养3~5天,筛选并鉴定出绿色木霉菌株,经二代连续培养出纯化绿色木霉菌株;再经液态PDA培养基中扩大培养,离心去清液,测定活性,再用二级纯水洗涤,离心,取沉淀并重复一次,吹干后保存于冰箱暗处;将离心后的清液放入PDA培养基中,再以几丁质或者结晶羧酸纤维素钠为反应底物,以秋水仙碱或者硫酸二乙酯作为诱变剂,进行诱变,诱变终止后,经离心取沉淀物,置于暗处稳定4~6h,即得绿色木霉突变株。该绿色木霉突变株可代替化学农药运用于农作物的种植,防治由土壤所产生的病害,实现作物增产。 | ||
搜索关键词: | 一种 绿色 突变 培养 方法 | ||
【主权项】:
一种绿色木霉突变株的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)绿色木霉菌株的培养与纯化:先从野外植物腐烂残体的水溶液取样,于26℃接种于PDA固体培养基上培养3~5天,筛选并鉴定出绿色木霉菌株,经二代连续培养出纯化绿色木霉菌株;(2)纯化绿色木霉菌株的扩大培养:纯化绿色木霉菌株再经液态PDA培养基中扩大培养,离心去清液,测定活性,再用二级纯水洗涤,以8000r/min离心15min,取沉淀并重复一次扩大培养,离心去清液,测定活性,再用二级纯水洗涤,以8000r/min离心15min,取沉淀吹干后保存于冰箱暗处;(3)纯化绿色木霉菌株的诱变:将步骤(2)中离心后的清液放入PDA培养基中,再以几丁质或者结晶羧酸纤维素钠为反应底物,以秋水仙碱或者硫酸二乙酯作为诱变剂,进行诱变,诱变终止后,经离心取沉淀物,置于暗处稳定4~6h,即得绿色木霉突变株;其中诱变剂的浓度为0.005~0.08wt%;诱变时间为6~120h。
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