[发明专利]一种花生种子特异启动子AHSSP1及其应用

摘要

本发明提供了一种花生种子特异启动子AHSSP1及其应用，该启动子含有重要的RNA聚合酶结合位点TATA box、CAAT box，以及种子启动子所特有的RY元件。经RT‑PCR对其驱动的下游基因AHSSP1进行检测，发现该基因在成熟种子表达，而在成熟植株的根、茎和叶片中不表达，表明AHSSP1是种子特异启动子。本发明进一步通过实验证明AHSSP1能驱动GUS报告基因在植物种子中特异表达。本发明获得的新的花生种子特异启动子AHSSP1，其克隆鉴定将对花生籽仁品质改良或以花生籽仁作为“生物反应器”异源合成药物蛋白等具有重要的应用价值。

主权项

1.花生种子特异启动子AHSSP1在驱动外源基因在植物的种子中特异表达中的作用，其特征在于：所述花生种子特异启动子AHSSP1为如SEQ ID No:1所示的核苷酸序列；扩增所述花生种子特异启动子AHSSP1的引物AHSSP1‑F2和AHSSP1‑R2序列为：AHSSP1‑F2：5’‑ AAGCTTGCAGAAATAGAAAGTGGGAACAAA ‑3’；AHSSP1‑R2：5’‑ GGATCCGTGGTGGTTATGGAATGTGTATTGAAGA ‑3’；扩增所述花生种子特异启动子AHSSP1的PCR扩增体系为：ddH2O 31 μL，含Mg2+的5×HF buffer 10 μL；浓度为2.5 mM 的dNTP 2 μL；浓度均为5 μM 的AHSSP1‑F2和AHSSP1‑R2各2 μL；DMSO 0.6 μL；Phusion酶0.5 μL；基因组模板2 μL；扩增所述花生种子特异启动子AHSSP1的PCR反应条件为：98 ℃预变性 30 s；98 ℃变性10 s，58 ℃退火 10 s，72 ℃ 50 s，30个循环；72 ℃后延伸10 min。