[发明专利]携带正交tRNA/氨酰tRNA合成酶的稳定细胞系的构建有效
| 申请号： | 201610055542.8 | 申请日： | 2016-01-27 |
| 公开（公告）号： | CN107012121B | 公开（公告）日： | 2021-01-26 |
| 发明（设计）人： | 周德敏;夏青;徐欢;张博;司龙龙;杨琦;姚天卓;张礼和 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/63;C12N9/02;C12N15/53 |
| 代理公司： | 北京骥驰知识产权代理有限公司 11422 | 代理人： | 唐晓峰 |
| 地址： | 100191*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及携带正交tRNA/氨酰tRNA合成酶稳定细胞系的构建方法。基于基因密码子扩展技术，利用一对正交的tRNA/氨酰tRNA合成酶将非天然氨基酸定点引入蛋白质，本发明还涉及双慢病毒载体的构建方法，携带多拷贝数正交tRNA载体的构建方法以及借助双慢病毒稳定转导、质粒稳定转染将正交的tRNA/氨酰tRNA合成酶基因稳定整合到细胞基因组的方法。本发明进一步涉及稳定细胞系的应用，如表达含有非天然氨基酸目的蛋白的用途。 | ||
| 搜索关键词： | 携带 正交 trna 氨酰 合成 稳定 细胞系 构建 | ||
【主权项】：
一种用于在蛋白质或肽的任意位点引入非天然氨基酸的细胞系，其特征在于所述细胞系携带有吡咯赖氨酰‑tRNA合成酶基因和源自古甲烷球菌的tRNA(tRNAPyl)。
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