[发明专利]一种抗大豆疫霉根腐病基因及应用

摘要

本发明公开了一种抗大豆疫霉根腐病基因及应用，属于大豆遗传育种技术领域。本发明所提供的抗大豆疫霉根腐病基因是大豆GmDRR基因，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所提供的基因可用于植物的遗传育种，尤其是大豆的遗传育种。同时，本发明还提供了该基因的应用方法，尤其是利用基因鉴定或筛选抗大豆疫霉根腐病品种的方法。通过检测本发明所提供的基因的表达量可预测其对大豆疫霉根腐病的抗性，大大提高了大豆抗疫霉根腐病的选择效率。

主权项

1.一种抗大豆疫霉根腐病基因在大豆育种过程中的应用，其特征在于：属于基因在分子标记辅助选择育种中的应用；所述基因，是大豆基因GmDRR，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；使用特异性引物GmDRRf和GmDRRr进行PCR扩增，其中，特异性引物GmDRRf的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，特异性引物GmDRRr的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；是以大豆GmUKN1基因或actin基因为内参基因，利用PCR定量分析待鉴定品种的GmDRR基因的表达量差异，分析待鉴定品种的大豆疫霉根腐病的抗性；所述大豆疫霉根腐病的抗性，是对大豆疫霉根腐病菌1号和3号生理小种的抗性；具体步骤如下：1)利用大豆疫霉根腐病菌1号或3号生理小种感染待测品种，获得感染品种；2)提取步骤1)所得的感染品种的cDNA，并以所得的cDNA为模板，以内参基因GmUKN1的引物对和目的基因GmDRR的特异性引物对为引物进行PCR扩增，并通过荧光定量PCR仪实时检测；3)根据步骤2)的检测结果分析待测品种的大豆疫霉根腐病抗性；步骤2)所述目的基因GmDRR的特异性引物对，为引物GmDRRf和GmDRRr，核苷酸序列分别如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示；所述内参基因GmUKN1引物对，分别如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示；步骤2)PCR扩增，扩增条件为：先在95℃30s的条件下进行一个循环，再在95℃5s；60℃30s的条件下进行40个循环；步骤3)所述分析待测品种的大豆疫霉根腐病抗性，是，如果在待测品种在接种大豆疫霉根腐病菌后：同时存在下列情况，则待测品种为抗性品种：在叶中基因GmDRR的表达量的最大增加速度，待测品种大于已知的抗性品种；在根中接种后6h内基因GmDRR的表达量呈正增长；在根中基因GmDRR的表达量最大量大于14倍；在根中基因GmDRR的表达量的最大增加速度，待测品种小于已知的抗性品种；同时存在下列情况，则待测品种为感病品种：在叶中基因GmDRR的表达量的最大增加速度，待测品种小于已知的感病品种；在根中接种后6h内基因GmDRR的表达量无增长；在根中基因GmDRR的表达量最大量小于12倍；在根中基因GmDRR的表达量的最大增加速度，待测品种大于已知的感病品种。