[发明专利]一种鉴别微孢子虫裂殖增殖期和孢子增殖期的双色荧光标记方法有效
| 申请号： | 201610060768.7 | 申请日： | 2016-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN105548123B | 公开（公告）日： | 2018-03-30 |
| 发明（设计）人： | 陈洁;郭伟;潘国庆;周泽扬;向仲怀 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司11275 | 代理人： | 王贵君 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鉴别微孢子虫裂殖增殖期和孢子增殖期的双色荧光标记方法，先将经封闭处理的组织切片或细胞采用β‑Tubulin抗体通过间接免疫荧光法标记裂殖增殖期的微孢子虫；再将组织切片或细胞用荧光增白剂染几丁质的方法标记孢子增殖期的微孢子虫；最后用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜对样品进行观察。本发明的方法替代了利用免疫透射电子显微镜观察不同增殖时期微孢子虫的复杂方法，操作过程简单，打破对电子显微镜的依赖性，便于观察，且易于利用多色荧光标记法进行微孢子虫蛋白的亚细胞定位，同时也适用于其他属微孢子虫，适用范围广泛。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 孢子 虫裂殖 增殖 荧光 标记 方法 | ||
【主权项】：
一种鉴别微孢子虫裂殖增殖期和孢子增殖期的双色荧光标记方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）将经封闭处理的组织切片或细胞采用β‑Tubulin抗体通过间接免疫荧光法标记裂殖增殖期的微孢子虫；（2）然后将封闭的组织切片或细胞用荧光增白剂染几丁质的方法标记孢子增殖期的微孢子虫；所述荧光增白剂为Calcofluor White M2R染色液；（3）用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜对样品进行观察。
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