[发明专利]多胺对盐胁迫下北美冬青叶绿素荧光特性的影响研究方法

摘要

本发明公开了一种多胺对盐胁迫下北美冬青叶绿素荧光特性的影响研究方法，该方法通过设定处理、含量及参数的测定和数据分析，能够科学合理地量化盐胁迫对北美冬青叶片叶绿素含量和荧光参数的影响，促进了解北美冬青在盐胁迫下的响应机制，同时进行了多胺对北美冬青的生长进行了研究，表明了外源多胺可以有效缓减盐胁迫对北美冬青的叶绿素荧光特性，从而提高了光合作用，增加了北美冬青的耐盐碱能力，为生长上进一步在沿海地区推广应用起到了一定的理论指导作用，为北美冬青耐盐性评价及抗盐性筛选提供一定的理论依据。

主权项

一种多胺对盐胁迫下北美冬青叶绿素荧光特性的影响研究方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤一、设定处理：选取生长健壮、无病虫害、长势基本一致的北美冬青四年生苗木，于智能实验大棚中进行栽培管理，每株苗木均栽培至盆中，常规管理养护1个月后进行盐胁迫试验，包括对照在内共设以下6种处理：①空白对照：CK；②多胺处理：0g·L^‑1NaCl+0.5mmol·L^‑1Spd；③中盐胁迫：4g·L^‑1NaCl；④中盐胁迫和多胺处理：4g·L^‑1NaCl+0.5mmol·L^‑1Spd；⑤重盐胁迫：8g·L^‑1NaCl；⑥重盐胁迫和多胺处理：8g·L^‑1NaCl+0.5mmol·L^‑1Spd；处理方法：每种处理重复4次，共24盆，每次浇施相隔1d，每盆浇施盐溶液500mL，并通过花盆下垫底盘回收外渗溶液，多胺Spd于叶面喷施至叶片沾湿即可。步骤二、含量及参数的测定：在经过步骤一处理后的0d、7d、14d、25d测定盐胁迫下北美冬青的各项指标，随机选取每个处理的3片相同生长部位与朝向的成熟叶片进行叶绿素含量和荧光参数的测定，并标记以便下一次测定。每个叶绿素含量和荧光参数测定3个重复。叶绿素含量的测定：采用叶绿素含量测定仪(YLS‑3N)测定。叶片荧光参数的测定：各荧光参数采用PAM2500荧光仪测定。荧光测定采用荧光叶室，黑暗适应一晚，光化学活性光PFD为1400μmol/m²s，光照时间30min，饱和闪光PFD为7200μmol/m²s。测定前，均进行25mins以上的暗适应。首先测定最小荧光产量(F₀)和最大荧光产量(F_m)，随后打开活化光，强度为800μmol·m^‑2s^‑1，待荧光信号到达稳定后(5～6mins)打开饱和脉冲光，测定任意时间的实际荧光产量(F)和光适应下的最大荧光产量(F_m′)；然后测定快速光曲线，共11个光强梯度，每个光强照射20s后打开饱和脉冲光进行荧光淬灭分析，记录快速光响应曲线。初始荧光产量(Fo)、最大荧光产量(Fm)、PSⅡ最大光化学量子产量(Fv/Fm)、PSⅡ有效光化学量子产量(F’v/F’m)、光化学淬灭(qP)、非光化学淬灭(qN)、PSⅡ实际光化学量子产量(Φ_PSⅡ)、PSⅡ电子传递速率(ETR)均由PAM2500荧光仪自动给出。步骤三、数据分析：采用SPSS软件进行统计分析，用Excel软件进行数据处理，采用Sigmaplot10.0作图，对测定后的数据进行处理并分析。