[发明专利]一种还原型谷胱甘肽降解产物F的分离纯化方法

摘要

本发明属医药技术领域，提供一种还原型谷胱甘肽降解产物F的分离纯化方法，以及其作为还原型谷胱甘肽有关物质检测中杂质对照品的用途。以水溶解还原谷胱甘肽，先采用MCI GEL自装柱进行初步分离，再采用高压制备液相色谱进行第二次分离纯化，高效液相色谱 SM-C18柱检测纯度，得到高纯度的谷胱甘肽降解产物F。本发明制备的高纯度谷胱甘肽降解产物F可作为杂质对照品，用于还原型谷胱甘肽的有关物质检查。

主权项

一种还原型谷胱甘肽降解产物F的分离纯化方法，包括以下步骤：（1）溶解：取还原型谷胱甘肽，加水溶解制成每1ml约含400mg的溶液；（2）第一次分离纯化：将步骤（1）所得溶液以中压色谱分离凝胶为固定相的自装层析柱进行初步分离，柱床直径为4~6cm，高度为60~100cm，平均粒径为70~150μm，洗脱剂为纯化水；以键合阴、阳离子配体的多模式色谱柱检测洗脱流分，流动相为三氟乙酸水溶液，紫外检测器在线检测，检测波长为200~210nm，根据检测结果合并洗脱流分；（3）第二次分离纯化：将步骤（2）所得洗脱流分采用高压制备液相色谱进行第二次洗脱分离，动态轴向压缩柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶微球，流动相为三氟乙酸水溶液，根据在线色谱图收集含有降解产物F的洗脱流分，合并洗脱流分；（4）冷冻干燥：用冻干法处理步骤（3）所得洗脱流分，即得降解产物F。