[发明专利]RNA甲基化测序文库的构建方法在审
申请号: | 201610065846.2 | 申请日: | 2016-01-29 |
公开(公告)号: | CN105603536A | 公开(公告)日: | 2016-05-25 |
发明(设计)人: | 邓腊梅;朱海浩;李明洲;宋彬彬;齐鑫 | 申请(专利权)人: | 北京诺禾致源生物信息科技有限公司 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06 |
代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 赵囡囡;吴贵明 |
地址: | 102200 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种RNA甲基化测序文库的构建方法。该构建方法包括:步骤S1,对RNA样品进行片段化,得到片段化RNA;步骤S2,利用RNA甲基化特异性抗体对片段化RNA进行免疫共沉淀,得到沉淀物;步骤S3,利用蛋白酶对沉淀物进行消化,得到消化物;步骤S4,从消化物中提取RNA并对提取的RNA进行逆转录,得到cDNA;以及步骤S5,利用cDNA进行测序文库构建,得到RNA甲基化测序文库。蛋白酶的消化作用较类似物的竞争洗脱作用更强,因而可提高RNA的得率,且避免了甲基化位点类似物所引入的噪音,解决了现有技术中所构建的文库噪音高的问题,提高了文库的构建质量,进而提高文库产出有效数据的利用率。 | ||
搜索关键词: | rna 甲基化 序文 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种RNA甲基化测序文库的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括:步骤S1,对RNA样品进行片段化,得到片段化RNA;步骤S2,利用RNA甲基化特异性抗体对所述片段化RNA进行免疫共沉淀,得到沉淀物;步骤S3,利用蛋白酶对所述沉淀物进行消化,得到消化物;步骤S4,从所述消化物中提取RNA并对提取的RNA进行逆转录,得到cDNA;以及步骤S5,利用所述cDNA进行测序文库构建,得到所述RNA甲基化测序文库。
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