[发明专利]一种可识别微丝菌的能量共振体系及其制备方法

摘要

本发明公开了一种可识别微丝菌的能量共振体系及其制备方法，先制备碲化镉量子点和长链烷基罗丹明荧光探针，再利用季铵盐溶液为载体制备共振体系来识别微丝菌。本发明效果为长链烷基罗丹明荧光探针量子产率高，荧光强度高，荧光性质稳定，共振后识别浓度低至0.05μmol/L。本发明中所制备量子点把能量通过能量共振转移给荧光探针，从而把荧光探针对微丝菌的识别浓度从10μmol/L降低至0.05μmol/L。

主权项

1.一种可识别微丝菌的能量共振体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)碲化镉量子点的制备：按照超纯水：碲粉：硼氢化钠＝(180‑220)ml：1g：(0.45‑1.6)g的比例加入到反应釜中，氮气置换三次，40‑50℃反应20‑40分钟，得到前驱体；按照氯化镉：巯基乙酸：超纯水：＝1g：(0.45‑1.6)g：(1800‑2200)ml的比例加入到反应釜中，用氮气置换三次，然后按照氯化镉：前驱体＝0.025g：(0.8‑5)ml，加入上述制备的前驱体，水浴加热至回流3‑30分钟，停止加热，降温待用，此为量子点水溶液；(2)具有长疏水链的长链烷基罗丹明荧光探针制备按照N,N‑二甲氨基酮酸：3‑(单或双)长链烷氨基‑苯酚：甲基磺酸＝1mmol：(1‑1.25)mmol：(5‑10)ml的比例加入到反应釜中，在N₂保护下，加热至85‑100℃反应，10‑16小时后停止反应，降至室温后加入甲基磺酸体积10倍的冰水，用饱和碳酸钠溶液中和至pH＝5‑7，过滤，将滤饼真空干燥得粗品，经柱层析分离，得长链烷基罗丹明；(3)能量共振体系的建立在50‑100μmol/L的季铵盐水溶液中，加入上述制备的量子点水溶液使其终浓度为0.1‑1μmol/L，加入上述长链烷基罗丹明荧光探针使其终0.05‑0.1μmol/L，震荡1分钟，能量共振溶液制备完成；所述3‑(单或双)长链烷氨基‑苯酚为3‑辛烷氨基‑苯酚、3‑双辛烷氨基‑苯酚、3‑十二烷氨基‑苯酚、3‑双十二烷氨基‑苯酚、3‑十六烷氨基‑苯酚或3‑双十六烷氨基‑苯酚；所述季铵盐为四丁基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵或苄基三乙基氯化铵。