[发明专利]制备纤溶酶组合物的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种制备纤溶酶组合物的方法及其应用。本发明的方法首先将特定中草药的粉碎过筛制备中草药粉，制得的中草药粉作为成分添加到枯草芽孢杆菌发酵培养基中，通过枯草芽孢杆菌的中草药粉液体深层发酵产生具有溶栓功效的纤溶酶。发酵结束后，将发酵液离心去除菌体和残渣沉淀，上清液经过浓缩、冷冻干燥制备得到中草药纤溶酶组合物。本发明的方法工艺简单，周期短、利于工业化生产，并且中草药纤溶酶组合物进一步拓展了纤溶酶单一溶解血栓的功效，克服了通过枯草芽孢杆菌大豆固体发酵的传统方法制备纤溶酶的产量低和功效单一的缺陷。

主权项

一种制备纤溶酶组合物的方法，它包括如下步骤：(1)中草药经过中草药粉碎机粉碎后，经过100～120目筛制备中草药粉；所选中草药原料选用黄芪、黄连、金银花和/或枸杞，以及选用丹参、葛根、三七和/或山楂；(2)将步骤(1)中制得的中草药粉作为营养成分添加到枯草芽孢杆菌培养基中；所述枯草芽孢杆菌培养基包括如下成分：选取的所述中草药原料成分各5g/L、葡萄糖5g/L、Na₂HPO₄·12H₂O 5g/L、NaH₂PO₄·2H₂O 1.0g/L、MgSO₄ 0.5g/L、CaCL₂ 0.3g/L,培养基pH 7.0～7.5；(3)步骤(2)中的中草药粉在枯草芽孢杆菌的液体深层发酵；所述枯草芽孢杆菌的发酵条件为：发酵温度30～32℃，初始pH值7.2～7.5，最适接种量5％；生长周期24～25h，最适放罐时间为26～28h；(4)步骤(3)中的发酵液经过5000rpm离心10～12min，去除沉淀，保留上清液；离心之后的发酵上清液经过冷冻干燥制得纤溶酶组合物。