[发明专利]四倍体青贮玉米倍性的早期鉴定技术在审
| 申请号： | 201610074832.7 | 申请日： | 2016-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN107014740A | 公开（公告）日： | 2017-08-04 |
| 发明（设计）人： | 姜敏;齐欣;刘祥久;王金君;马骏;弓雪;刘欣芳;李明;李泉木;孟庆国;王金燕;孙甲;孙丽慧;刘凤宝 | 申请（专利权）人： | 辽宁省农业科学院玉米研究所;姜敏;齐欣 |
| 主分类号： | G01N15/14 | 分类号： | G01N15/14 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 110161 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种四倍体青贮玉米的倍性鉴定方法，属于生物技术领域。利用OTTO buffers制备细胞核悬液，采用美国Becton-Dickinson公司的流式细胞仪，发光源为488nm氩离子蓝色激光；测定DNA分子荧光强度，对照二倍体植株主峰荧光强度调至200通道处，如待测植株主峰值处在200通道处视为二倍体，而处在400通道处视为四倍体。流式细胞仪倍性检测结果与显微镜检测及成株期形态鉴别相一致。应用此法，可在幼苗期快速鉴定出四倍体青贮玉米的倍性，提高育种效率。 | ||
| 搜索关键词： | 四倍体 青贮 玉米 早期 鉴定 技术 | ||
【主权项】：
取100mg叶片加入1ml OTTO I中，用剪刀将叶片剪碎，冰孵5‑10min，8000r/min离心5min，弃上清，加入1ml OTTO I 1000r/min离心5min，弃上清，加入100μl OTTO I和200μlOTTO II混合液，过300目筛子，加入终浓度为50μg/ml PI染液，暗处理染色15min，过500目筛子，上机检测。以普通二倍体玉米2n＝20为对照，二倍体对照分离峰的荧光强度处在200附近，待测植株峰值处在200附近的视为二倍体，而处在400附近则视为四倍体。
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