[发明专利]海洋弧菌指纹图谱的建立方法及其指纹图谱在审
| 申请号： | 201610075472.2 | 申请日： | 2016-02-03 |
| 公开（公告）号： | CN105758926A | 公开（公告）日： | 2016-07-13 |
| 发明（设计）人： | 胡成进;武静;周月霞;刘晓斐;陈英剑 | 申请（专利权）人： | 胡成进 |
| 主分类号： | G01N27/62 | 分类号： | G01N27/62;G01N1/28 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 张世静 |
| 地址： | 250031 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种海洋弧菌指纹图谱的建立方法，具体为将哈维氏菌等83株中的其中一株制备蛋白样品，利用MALDI‑TOF/TOF MS，获得蛋白指纹图谱，本发明构建了83株海洋弧菌的蛋白指纹图谱，建立了海洋弧菌鉴定数据库，使得鉴定海洋弧菌的准确性增加，大大缩短了海洋弧菌鉴定的时间。 | ||
| 搜索关键词： | 海洋 弧菌 指纹 图谱 建立 方法 及其 | ||
【主权项】：
一种海洋弧菌指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：1）在EP管中加入300 ul去离子水；取待测微生物样本一个独立菌落至EP管中，充分混匀；加入900 ul乙醇，充分混匀；13000 rpm离心2分钟，倒去上清，再次离心，移去上清，室温下干燥沉淀2‑3分钟；加入70%甲酸水溶液10ul，充分混合；加入纯乙腈10ul，充分混匀；13000 rpm离心2分钟，上清液即为制备的蛋白样品；2）将上述蛋白样品分别上质谱仪样品靶，样品干燥后，覆盖基质，所述基质为α‑ 氢基‑4‑ 羟基肉桂酸在50％乙腈、2.5％三氟乙酸中的饱和液打开质谱仪舱门把靶板放进去；用标准品进行仪器校正，设定参数对蛋白质指纹图谱进行标准化处理；采集2000‑20000Da 范围内的肽图谱，即为海洋弧菌的指纹图谱。
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