[发明专利]一种敲除猪DJ-1基因的细胞的构建方法及其应用

摘要

本发明提供了一种敲除猪DJ-1基因的细胞的构建方法，包括1)针对DJ-1基因构建TALENs质粒；2)将步骤1)得到的TALENs质粒和pCAG-GFP质粒共转染猪胎儿成纤维细胞；3)将步骤2)转染过的猪胎儿成纤维细胞通过分选得到单细胞，所述单细胞经传代扩繁后，经过筛选得到DJ-1基因敲除的细胞。本发明还提供了基于上述细胞构建DJ-1基因敲除猪的方法。本发明为研究基因功能和DJ-1相关疾病，如帕金森病的发病机理提供了非常好的构建动物模型的方法。

主权项

一种敲除猪DJ‑1基因的细胞的构建方法，其特征在于，所述方法包括：1)针对DJ‑1基因构建TALENs质粒；2)用步骤1)得到的TALENs质粒和pCAG‑GFP质粒共转染猪胎儿成纤维细胞；优选地，所述猪胎儿成纤维细胞在共转染前复苏并在38.5℃、低氧(5％O2)、5％CO2培养箱中培养；3)将步骤2)共转染过的猪胎儿成纤维细胞通过分选得到单细胞，所述单细胞经传代扩繁后，经过鉴定得到DJ‑1基因敲除的细胞。