[发明专利]一种用HPLC同时测定藤茶中11种黄酮类成分的方法

摘要

本发明公开了一种用HPLC同时测定藤茶中11种黄酮类成分的方法，属于药用植物成分分析技术领域，是先分别配制混合标准品溶液与藤茶供试样品溶液，然后采用高效液相色谱分别对混合标准品溶液与供试样品溶液进行检测，经计算获得供试样品中二氢杨梅素、二氢槲皮素、香橙素、柚皮素、橙皮素、杨梅素、杨梅苷、山奈酚、槲皮素、芦丁和芹菜素的含量。本发明测定方法稳定性和重现性好，操作简单、结果准确可靠，可应用于藤茶中多种黄酮类成分的同时测定。

主权项

一种用HPLC同时测定藤茶中11种黄酮类成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）混合标准品溶液的制备：分别精密称取适量的二氢杨梅素、二氢槲皮素、香橙素、柚皮素、橙皮素、杨梅素、杨梅苷、山奈酚、槲皮素、芦丁和芹菜素标准品于10 mL棕色容量瓶中，用无水甲醇溶解并定容至刻度，得到各成分浓度分别为112.5、135、150、125、165、125、210、138、99、300、100mg·L‑1的混合标准品溶液；2）供试样品溶液的制备：将藤茶样品用液氮研磨成粉末，冷冻干燥至含水量小于5%，然后将其粉碎、过筛后，称取所得冻干粉0.1 g于三角瓶中，加入10 mL无水甲醇，摇匀，37℃振荡提取12 h，4500 r/min离心15 min，残渣再加10 mL无水甲醇，于相同条件下重复提取1次，并用少量无水甲醇洗涤残渣，合并3次上清液并定容至25 mL，得供试样品溶液；3）将所得混合标准品溶液与供试样品溶液分别经0.45μm有机微孔滤膜过滤后，采用高效液相色谱进行检测，经计算获得供试样品中二氢杨梅素、二氢槲皮素、香橙素、柚皮素、橙皮素、杨梅素、杨梅苷、山奈酚、槲皮素、芦丁和芹菜素的含量；其高效液相色谱的条件为：色谱柱：VisionHT C18柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：无水甲醇‑0.4wt%磷酸水溶液；流速：1.0 mL·min‑1；柱温：30℃；进样体积：5μL；检测波长：290 nm，360 nm；梯度洗脱程序为：0~20 min，无水甲醇的体积浓度为30%；20~30 min，无水甲醇的体积浓度由30%增加至40%；30~45 min，无水甲醇的体积浓度由40%增加至42%；45~60 min，无水甲醇的体积浓度由42%增加至50%。