[发明专利]以多重DNA片段为模板制备RNA或DNA探针的方法在审
| 申请号： | 201610083212.X | 申请日： | 2016-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN105506035A | 公开（公告）日： | 2016-04-20 |
| 发明（设计）人： | 徐学明;鲁隼;冯俊清 | 申请（专利权）人： | 广州复能基因有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人： | 刘宇峰 |
| 地址： | 510663 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种以多重DNA片段为模板制备RNA或DNA探针的方法。该方法包括以下步骤：从体外转录的基因特异性cDNA或是基因组中特定基因DNA序列中筛选出多个靶序列，对于每个靶序列设计至少一对引物，所述引物的PCR扩增产物为多重DNA片段，所述多重DNA片段能包括所有靶序列；以所述多重DNA片段为模板，进行以下反应：加入RNA聚合酶和带有生物素标记的UTP进行反应，将UTP掺入产物，纯化后得到RNA探针；或者加入DNA聚合酶和带有生物素或萤光标记的dUTP进行反应，将dUTP掺入产物，纯化后得到DNA探针。本发明首次用多重DNA片段作为模板，针对待检测目标序列设计多对引物，并在反向引物5’端加上启动子或RNA聚合酶结合序列，以使最终得到的RNA探针能够全部覆盖靶序列。 | ||
| 搜索关键词： | 多重 dna 片段 模板 制备 rna 探针 方法 | ||
【主权项】：
一种以多重DNA片段为模板制备RNA或DNA探针的方法，其特征在于，包括以下步骤：A.从体外转录的基因特异性cDNA或是基因组中特定基因DNA序列中筛选出多个靶序列，对于每个靶序列设计至少一对引物，所述引物的PCR扩增产物为多重DNA片段，所述多重DNA片段能包括所有靶序列；B.以所述多重DNA片段为模板，进行以下反应：a.加入RNA聚合酶和带有生物素标记的UTP进行反应，将UTP掺入产物，纯化后得到RNA探针；或者b.加入DNA聚合酶和带有生物素或萤光标记的dUTP进行反应，将dUTP掺入产物，纯化后得到DNA探针。
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