[发明专利]检测机械力对DNA与DNA聚合酶相互作用影响的方法在审
申请号: | 201610083886.X | 申请日: | 2016-02-05 |
公开(公告)号: | CN105648066A | 公开(公告)日: | 2016-06-08 |
发明(设计)人: | 张萍;李宾;张峰;周星飞;胡钧 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海应用物理研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 薛琦;沈利 |
地址: | 201800 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测机械力对DNA与DNA聚合酶相互作用影响的方法。其包括以下步骤:利用原子力显微镜对含有dNTP、两端分别固定于空心DNA折纸内侧边缘上两个不同位点的单链DNA模板及结合所述单链DNA模板的DNA聚合酶Klenow片段的缓冲体系进行扫描,两个不同位点不位于同一直线边缘上,缓冲体系置于新解离的云母衬底上,通过原子力显微镜成像观察双链DNA的合成。本发明提供的检测方法获取非双螺旋方向机械力对DNA和DNA聚合酶结构和功能作用的信息进而得到机械力对DNA合成的影响,且可在纳米尺度上精确定位,为检测一定张力条件下的DNA与DNA聚合酶的相互作用关系提供了条件。 | ||
搜索关键词: | 检测 机械 dna 聚合 相互作用 影响 方法 | ||
【主权项】:
一种检测机械力对单链DNA与DNA聚合酶相互作用影响的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:利用原子力显微镜对含有dNTP、单链DNA模板‑空心DNA折纸及结合所述单链DNA模板的DNA聚合酶Klenow片段的缓冲体系进行原子力显微镜扫描成像观察双链DNA的合成;所述缓冲体系在新解离的云母衬底上,所述单链DNA模板‑空心DNA折纸由空心DNA折纸和两端分别固定于空心DNA折纸内侧边缘上两个不同位置的单链DNA模板组成,所述两个不同位置不位于同一直线边缘上。
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