[发明专利]曼地亚红豆杉的遗传育种方法

摘要

本发明公开了一种曼地亚红豆杉的遗传育种方法，包括如下步骤花粉采集、授粉、施肥、挂果、沙藏、播种、移栽。本发明方法解决红豆杉属植株种间花期不同步导致授粉育种困难的问题，简便易行，且采用喷施的方式进行大量的生产实践。本发明对于曼地亚红豆杉属植物资源的深度开发和广泛应用具有重要而深远的意义，应用前景广阔。

主权项

曼地亚红豆杉的遗传育种方法，其包括如下步骤：（1）采集花粉：采集南方红豆杉雄株的花粉，自然干燥，剔除杂质后，分别置于EP管4℃冷藏备用，并保持干燥；（2）授粉：取出步骤（1）制备的花粉，室温放置一小时使其恢复常温；按照花粉：超纯水= 1：1000 的重量比例配置成花粉液，将南方红豆杉花粉授粉曼地亚红豆杉雌株，每隔四天使用喷壶喷施授粉一次，共授粉3次；（3）施肥：授粉后，按照氮、磷、钾的重量比例为1:3:1，喷施3次叶面肥；（4）挂果：挂果后喷施营养液，营养液成分为：N200mg/L、P33mg/L、K66mg/L，磷肥以NH4H2PO4 形式加入，钾肥以KNO3形式加入，氮肥除以NH4H2PO4和KNO3的形式加入外，不足部分用（NH4）2SO4 补充；待种子成熟后，采集种子；（5）沙藏：将采集的种子冷水浸种6天，每天换水一次，浸种后将种子表面水分晾干，低温沙藏，按沙子：种子为4:1的重量比进行；（6）播种：将沙藏的种子灭菌后，用280mg/L GA3+20mg/L 6‑BA +30mg/L KT+8mg/L ABT浸泡种子24小时，然后播种，获得无菌试管苗；（7）移栽：将无菌试管苗炼苗10～15天，然后将其取出，洗净根部的培养基，将其根部浸泡在复合微生物制剂中30min，促进新根的生长；所述复合微生物制剂包括以下重量配比的原料：假丝酵母菌发酵液：地衣芽孢杆菌发酵液：产黄纤维单胞菌发酵液：粪产碱杆菌发酵液：赤霉素：活性炭：磷酸氢二钾＝4：2：2：3：1：2：1；所述假丝酵母菌为假丝酵母菌（Candida utilis）ATCC No.22023;所述地衣芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）CGMCC No.2276；所述产黄纤维单胞菌为产黄纤维单胞菌（cellulomonas flavigena）ATCC No.482；所述粪产碱杆菌为粪产碱杆菌（Alcaligenes faecalis）ATCC No.31555。