[发明专利]分泌抗马铃薯Y病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用有效
申请号: | 201610096251.3 | 申请日: | 2016-02-22 |
公开(公告)号: | CN105543176B | 公开(公告)日: | 2019-01-01 |
发明(设计)人: | 周雪平;吴建祥;宋革 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/10;G01N33/577;G01N33/569 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 张法高 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种分泌抗马铃薯Y病毒(PVY)单抗杂交瘤细胞株及其单抗的应用。利用差速离心法提纯的PVY病毒粒子为抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、筛选、克隆,获得1株能稳定传代并分泌抗PVY单抗的杂交瘤细胞株3B2,其保藏号为CGMCC No.12001。该细胞株分泌单抗腹水间接ELISA效价达10‑7,抗体类型及亚类为IgG1、kappa轻链,该单抗与30kDa的PVY外壳蛋白有特异反应。利用3B2单抗建立检测作物上PVY的ACP‑ELISA、dot‑ELISA和Tissue blot‑ELISA检测方法,其中ACP‑ELISA和dot‑ELISA方法检测病叶的灵敏度分别达到1:81920和1:10240倍稀释(w/v,g/mL)。抗PVY单抗的制备及其检测方法的建立为该马铃薯病毒病的诊断和检测、流行病学分析及科学防控提供物质和技术支撑。 | ||
搜索关键词: | 分泌 马铃薯 病毒 杂交瘤 细胞株 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种分泌抗马铃薯Y病毒单抗杂交瘤细胞株3B2,其特征在于能分泌抗马铃薯Y病毒单抗,所述的杂交瘤细胞株3B2于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.12001。
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