[发明专利]豆粉中黄曲霉定性标准样品及其制备方法

摘要

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种豆粉中黄曲霉定性标准样品及其制备方法。本发明根据黄曲霉具有分类学意义的技术指标，解决了黄曲霉实物标准样品溯源参照系与参照指标问题，并应用于本标准样品的定值分析中，在标准样品定性测试理论的研究成果基础上，在国家生物安全标准样品体系框架下，以来源明确的产毒真菌黄曲霉模拟自然污染豆粉样品，采集对数生长期的黄曲霉ATCC28539孢子污染无菌豆粉，混合仪拍打混合，分装，冻干制备出一种生物及产毒信息完整的黄曲霉实物标准样品，获得具有真正溯源意义的黄曲霉实物标准样品，是国内首次分类定级标准样品的研制，具有重要的意义。

主权项

一种豆粉中黄曲霉定性标准样品，其特征在于：所述豆粉中黄曲霉定性标准样品包含的序列为：内转录间隔区基因（ITS）序列：TCCGTAGGTGAACCTGCGGAAGGATCATTACCGAGTGTAGGGTTCCTAGCGAGCCCAACCTCCCACCCGTGTTTACTGTACCTTAGTTGCTTCGGCGGGCCCGCCATTCATGGCCGCCGGGGGCTCTCAGCCCCGGGCCCGCGCCCGCCGGAGACACCACGAACTCTGTCTGATCTAGTGAAGTCTGAGTTGATTGTATCGCAATCAGTTAAAACTTTCAACAATGGATCTCTTGGTTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAACTAGTGTGAATTGCAGAATTCCGTGAATCATCGAGTCTTTGAACGCACATTGCGCCCCCTGGTATTCCGGGGGGCATGCCTGTCCGAGCGTCATTGCTGCCCATCAAGCACGGCTTGTGTGTTGGGTCGTCGTCCCCTCTCCGGGGGGGACGGGCCCCAAAGGCAGCGGCGGCACCGCGTCCGATCCTCGAGCGTATGGGGCTTTGTCACCCGCTCTGTAGGCCCGGCCGGCGCTTGCCGAACGCAAATCAATCTTTTCCAGGTTGACCTCGGATCAGGTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGA；核糖体rRNA 18S基因（18S）序列：GTAGTCATATGCTTGTCTCAAAGATTAAGCCATGCATGTCTAAGTATAAGCACTTTATACTGTGAAACTGCGAATGGCTCATTAAATCAGTTATCGTTTATTTGATAGTACCTTACTACATGGATACCTGTGGTAATTCTAGAGCTAATACATGCTAAAAACCTCGACTTCGGAAGGGGTGTATTTATTAGATAAAAAACCAATGCCCTTCGGGGCTCCTTGGTGATTCATAATAACTTAACGAATCGCATGGCCTTGCGCCGGCGATGGTTCATTCAAATTTCTGCCCTATCAACTTTCGATGGTAGGATAGTGGCCTACCATGGTGGCAACGGGTAACGGGGAATTAGGGTTCGATTCCGGAGAGGGAGCCTGAGAAACGGCTACCACATCCAAGGAAGGCAGCAGGCGCGCAAATTACCCAATCCCGACACGGGGAGGTAGTGACAATAAATACTGATACGGGGCTCTTTTGGGTCTCGTAATTGGAATGAGTACAATCTAAATCCCTTAACGAGGAACAATTGGAGGGCAAGTCTGGTGCCAGCAGCCGCGGTAATTCCAGCTCCAATAGCGTATATTAAAGTTGTTGCAGTTAAAAAGCTCGTAGTTGAACCTTGGGTCTGGCTGGCCGGTCCGCCTCACCGCGAGTACTGGTCCGGCTGGACCTTTCCTTCTGGGGAACCTCATGGCCTTCACTGGCTGTGGGGGGAACCAGGACTTTTACTGTGAAAAAATTAGAGTGTTCAAAGCAGGCCTTTGCTCGAATACATTAGCATGGAATAATAGAATAGGACGTGCGGTTCTATTTTGTTGGTTTCTAGGACCGCCGTAATGATTAATAGGGATAGTCGGGGGCGTCAGTATTCAGCTGTCAGAGGTGAAATTCTTGGATTTGCTGAAGACTAACTACTGCGAAAGCATTCGCCAAGGATGTTTTCATTAATCAGGGAACGAAAGTTAGGGGATCGAAGACGATCAGATACCGTCGTAGTCTTAACCATAAACTATGCCGACTAGGGATCGGGCGGTGTTTCTATGATGACCCGCTCGGCACCTTACGAGAAATCAAAGTTTTTGGGTTCTGGGGGGAGTATGGTCGCAAGGCTGAAACTTAAAGGAATTGACGGAAG；核糖体rRNA 28S基因（28S）序列：GTGAAATTGTTGAAAGGGAAGCGCTTGCGACCAGACTCGCCTCCAGGGTTCAGCCGGCATTCGTGCCGGTGTACTTCCCTGGGGGCGGGCCAGCGTCGGTTTGGGCGGCCGGTCAAAGGCTCCCGGAATGTAGTGCCCTCCGGGGCACCTTATAGCCGGGAGTGCAATGCGGCCAGCCTGGACCGAGGAACGCGCTTCGGCACGGACGCTGGCATAATGGTCGTAAACGACCCGTCTTGAAACACGGACCAAGGAGTC；转录调节子编码基因（aflR）序列：CGCGCGAGATACTTCTTATACTAAACCTCGAATTGCCATTCCACTGACGACCGGCGGGGGAGGACAGCCTTCCAATTACTATATGGCAAGTTATATGCCCTCTTCAGCACCAAATGGGTCTTTCTCGTCGCCCTGGGTATTTTCGAAGTGGGCTC；易化子超家族转运蛋白基因（Aflt1）序列：GCACCAAATGGGTCTTTCTCGTCGCCCTGGGTATTTTCGAAGTGGGCTCTCTGATCTGCGGCGTCGCACCGTCGTCCGTAGTTCTCATCGTCGGCCGTGCCATCGCGGGAGTGGGGAGCTCGGGGATCTTTACAGGTGCTCTGGTCACCATGCGGCATATTGTGCCCTTGGCCAAGCGACCAGTTTACATGGGGCTCTTGGGGGGGATGTACGGGATTGCGTCAGTGGCAGGCCCTCTGGTAAGTCACCGTTGATGCACCCGGCGGCTGTGACGGGCACCATTAACCGTTCCTTGTGAATCGCAGTTGGGGGGCGCCTTCACGAACGAAGTGACCTGGCGATGGTGCTTCTACATCAATCTTCCGGTCGGAGGGGTCACCGCTGTGGTTATCCTGTTTCTTCTTCGGATCCCCAAATCGGCGGACCTGCGCACGCATGGCGCCTGGGAGATGTTGAAAGGCTTAGATCCGTTAGGCACGATTGTCTTCACCCCGTCCATCATCTGCGTTCTCCTGGCGCTCCAGTGGGGTGGGGTGGACTACGCTTGGTCGAATGGACGCATTATCGCGCTGTTTGTTCTCTTCGGCGTGCTCCTCATCACATTTATCGTCATTCAGGTCCTCATGAAGGATAACGCCACCGGTATGGTATTCCTCCGTTGGTTTCCATCCGTTCTGTAAGCCTCGCTCACCACTCCCGCCAGTACCGATCAAAGTAGCCTCTCAGCGATCCGTAGCATGCGCCTCCGTCTTCGTCTTCTTCATCGGCGCCTCCATGTTCGTGATGATCTACTATGTGCCGATCTGGGTAACCTGCCTCTCCCTAGTCCCCTCCCTGTGTGATGTGTCGCACCACGCCACGATATTGCTAATGCATATCCAATAGTTCCAAGCCATTCGCAACCAATCACCCGTGCAGGCAGGCATTGATTCTATTGCCTTGATTTTGGCCAATACCGCCGGTGCCATCATCTCTGGCGCCGTGACCAATAAGACAGGGCACTACGCCCACTGGTTTATTGTCAGTAGCGTGATCATGTCGATTGGCGCCGGCTGCCTTACCCTCTTCACCGTGGAT；易化子超家族转运蛋白基因（Aflt2）序列：CGCGCGAGATACTTCTTATACTAAACCTCGAATTGCCATTCCACTGACGACCGGCGGGGGAGGACAGCCTTCCAATTACTATATGGCAAGTTATATGCCCTCTTCAGCACCAAATGGGTCTTTCTCGTCGCCCTGGGTATTTTCGAAGTGGGCTC；降散盘衣酸还原酶基因（Nor‑1）序列：ACCGCTACGCCGGCGCTCTCGGCACTAACCGTCGCTGAAGGCAGTCGGATGATCATAGTGCAGCTTAACTGCGACTCGGAAACTGATGCCCAGGCAGCCGTCCAGACATTGCGGGAGGAGCACGGGGTGACGCACTTGGACGTGGTGGTTGCCAATGCGGCCATGGCGACGAACTTTGGGCCCGCGTCCACCATGCCCCTCGAGCATCTCCAGGCACACATGATGGTCAACATGTATGCTCCCGTCCTACTGTTTCAGGCAACCCGCCTGATGCTGCAGCAGTCCAAGCAACAGGCCAAGTTTGTCTTGATCGGCGCCCCGATCAGCACCATCACCAACATGCACGACTATGCGCGGGCCCCACTGACGGCGTACGGAGTGTCGAAGCTGGCGGCCAAC；柄曲霉素转甲氧基酶基因（Omt‑1）序列：GTGGACGGACCTAGTCCGACATCACTCGACACAATCGTCGCCGCGACCGGAGTCTCCGAGGATTTACTACGTATGAGCTTCCATGTCTATAGGTCATCCACTGAAAGGCAGTGCATTAATCAATATTCAGGACGGATTCTTCGAGGATGTGCCCAGCGCTTCATCTTTGAGGAGGTTGCCCCTGACCAATACGCCCACACAGATGCCTCAAAGATGCTGCGAGTGACGGGTATTCATGCCTTGGTTGGATTCTCGTGAGTCTCCTTCTTTAACAATAAACTACCAGATGTCCTCACCAGGGAGACCGAGTTAGATGTGACGAAGTGATGCGGTCGGGTGCCTACTTTTCCGACTTCTTGCAGCAGACGAAAGGCAAACCTCCGAGTTGGAATGTGCCTTCACCTTTCTCATTGGCATTTGATCGTAGGTATTCCACTCTATCTAGATAGGAACGCAGCTGAAATGCGAGAAACAGCTACCAAAGGGCTATTTGACTATTACAGCACTGTGGACGAGGTTCGCGGCCGCCGCTTTGATCTAGGTATGGGTGGCACCGAAGCCACGAAGCCACTGGTAGAGGAGATGTTTGATTTCGACAGTCTACCTGAGGGGAGCACCGTTGTCGATGTGGGCGGCGGTCGTGGTCATCTCAGCCGACGGGTTTCGCAAAAGCATCCCCACCTCAGGTTCATCGTACAGGACCTGCCTGCCGTCATTCACGGAGTTGAGGACACTGATAAAGTCACCATGATGGAGCATGACATTCGGCGCCCCAACCCAGTGCGTGGCGCCGAC；杂色曲霉素A脱氢酶基因(Ver‑1)序列：TGAACTACGCCCACTCCCGGGAGGCCGCGGAGAAGGTAGTTCAACAGATCAAGGCCAACGGCACCGACGCTATCGCAATCCAGGCCGATGTCGGGGATCCTGAGGCGACGGCGAAGTTAATGGCGGAGACGGTGCGCCATTTTGGCTACCTGGACATTGTGTCATCGAACGCTGGAATTGTATCGTTCGGTCACCTGAAAGACGTGACCCCAGAAGTATGAACCACAGATAACGCATTCAAGGCATATGCTAATGAAAACATTAGGAGTTTGACCGGGTCTTCCGGGTCAACACTCGTGGCCAGTTCTTCGTGGCGCGGGAGGCCTATCGCCATATGCGGGAAGGAGGCCGGATTATCCTGACCAGCTCTAACACCGCTTGCGTCAAAGGGGTACCCAAGCATGCTGTATACTCCGGGTCCAAAGGAGCTATTGACACCTTTGTTCGCTGCATGGCCATTGACTGCGGAGACAAGAAAATCACCGTGAATGCGGTGGCTCCTGGAGCCATCAAGACTGATATGTTTTTGCCTGTGTCGCGGGAGTATATCCCC。