[发明专利]多价多特异性抗体及免疫杂合蛋白的表达和制备方法

摘要

本发明公开了一种生物技术领域的多价多特异性抗体及免疫杂合蛋白的表达和制备方法；本发明运用蛋白Intein的特性，设计并开发了一种新的制备多价特异抗体、或抗体与细胞因子融合的杂合免疫蛋白、或抗体与毒素蛋白融合的免疫毒素、或者抗体和其他活性蛋白融合的免疫杂合蛋白的方法。本发明将杂合蛋白的各部分分别在合适的原核或真核细胞系统中表达，经高效的亲和层析纯化分离，然后在体外在intein剪接的条件下进行剪接，达到制备多价特异性抗体及免疫杂合蛋白的产物。本方法具有生产效率高，适和应用的面广，并有利于产物分离纯化。本发明提供了制备定向攻击癌症或其他疾病的生物药物的新方法。

主权项

一种多价多特异性抗体的表达和制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：S1、将所述多价多特异性抗体的表达序列进行拆分，获得若干部分抗体，包括A部分抗体和B部分抗体；所述A部分抗体包括第一轻链、第一重链和第二重链的Fc链，该Fc链的N端融合了IC；所述B部分抗体包括第二轻链和第二重链的VH+CH1链，该VH+CH1链的C端融合了IN；所述第一轻链和第一重链为特异性结合第一抗原的抗体的第一轻链和第一重链；所述第二轻链和第二重链为特异性结合第二抗原的抗体的第二轻链和第二重链；S2、经全基因合成构建真核或原核生物表达载体，用瞬转或稳转方法分别表达、制备包括A部分抗体和B部分抗体的所述若干部分抗体；S3、进行A部分抗体和B部分抗体的体外反式剪接，或是进行A部分抗体、B部分抗体和其他部分抗体的体外反式剪接，即得所述多价多特异性抗体。