[发明专利]一种基于GC-MSQQQ的卷烟指纹图谱分析方法

摘要

本发明公开了一种基于GC‑MSQQQ的卷烟指纹图谱分析方法，经过卷烟样品溶剂浸提、GC‑MSQQQ指纹图谱的获得、夹角余弦和欧氏距离计算分析，从而判定卷烟内在质量稳定性。本发明的特征是，针对卷烟的特征致香成分，通过超声提取、首先运用全扫描模式(SCAN)进行检测，对其中29种含量最高的组分定性分析，然后建立多反应模式(MRM)检测方法，对其进行定量分析，获得的指纹图谱基线平稳、分离度高、定量更加准确。本发明能客观的反映卷烟的内在质量稳定性，作为传统的人工评吸感官质量评价方法的有效补充，评价更具科学性，不仅有助于稳定产品质量，而且能够为异地加工的产品质量一致性提供技术支撑。

主权项

1.一种基于GC‑MSQQQ的卷烟指纹图谱分析方法，其特征在于，包括以下步骤：1)样品前处理：将卷烟烟丝磨碎成末，过40目筛，混合均匀，准确称取1.0000g烟末25mL具塞三角瓶中，准确加入10mL甲醇，100μL乙酸苯乙酯内标储备液，样品浸泡24h，室温下超声提取30min，静置10min后，取上层清液用0.45μm有机滤膜过滤，待GC‑MSQQQ分析；2)仪器分离检测：a、GC分离条件：色谱柱：HP‑5MS毛细管柱；进样口温度：250℃；载气：高纯He，恒定流速：1.0mL/min；进样量：1μL；分流比：30︰1；程序升温：初始温度60℃，保持3min，以10℃/min的速率升至280℃，保持10min；b、MSQQQ检测条件：离子源：EI；电离能量：70eV；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；传输线温度：250℃；谱图检索：NIST谱库；MS1Scan扫描模式：首先对待测样品溶液进行MS1Scan模式全扫描，扫描范围35～450amu，对色谱图中含量最高的30种组分进行谱库检索，定性分析以确定组分名称，并选丰度最高的离子作母离子；Product ion扫描模式：根据全扫面谱图确定30种组分的时间片断和驻留时间，观察各组分母离子的子离子扫描图，选择丰度最高的特征子离子作为MRM方法的子离子；MRM扫描模式：对确定的30对离子对分别设定不同碰撞池电压的运行序列，优化每个子离子的最佳碰撞能量，最后使用优化的碰撞能量，离子源参数保持不变，建立MRM方法；3)指纹图谱数据分析：对10个不同批次的卷烟样品进行MRM监测方法测定，以选定的所有共有峰作为样品的特征指纹峰，以乙酸苯乙酯作为内标物参照峰求出各特征指纹峰的相对保留时间α值和相对峰面积Sr值，利用夹角余弦和欧氏距离计算相似度，建立标准指纹图谱；a、夹角余弦：反映指纹图谱特征变量变化模式的相似度，对指纹图谱峰强度的变化进行评价；式中：Cir—第i批次样品与标准指纹图谱的相似度；Xik—第i批次样品的第k个特征变量；Xrk—共有模式均值向量的第k个特征变量；b、欧式距离：反映研究对象之间的亲疏程度，与指纹图谱数据的线性比例关系有关，表征内在成分浓度的变化；式中：dir—第i批次样品与标准指纹图谱的欧式距离；Xik—第i批次样品的第k个特征变量；Xrk—共有模式均值向量的第k个特征变量。