[发明专利]一种抗RSV病毒的中药复方提取物及其制备方法和用途有效
申请号: | 201610107921.7 | 申请日: | 2016-02-26 |
公开(公告)号: | CN105748979B | 公开(公告)日: | 2019-08-27 |
发明(设计)人: | 田景振;崔清华;侯林 | 申请(专利权)人: | 山东中医药大学 |
主分类号: | A61K36/899 | 分类号: | A61K36/899;A61P31/14 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 龚燮英 |
地址: | 250355 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种抗RSV病毒的中药复方提取物及其制备方法和用途,所述中药复方提取物包括金银花提取物、蒲公英提取物、大青叶提取物、板蓝根提取物、赤勺提取物、秦艽提取物、荆芥提取物、淡竹叶提取物、甘草、薄荷和连翘。所述中药复方提取物具有良好的抗RSV病毒性能,从而可以用来治疗和/或预防因RSV病毒导致的各种呼吸道疾病,在临床上具有广阔的研究价值和应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 rsv 病毒 中药 复方 提取物 及其 制备 方法 用途 | ||
【主权项】:
1.一种抗RSV病毒的中药复方提取物,所述中药复方提取物包括金银花提取物、蒲公英提取物、大青叶提取物、板蓝根提取物、赤勺提取物、秦艽提取物、荆芥提取物、淡竹叶提取物、甘草、薄荷和连翘;以重量份计,所述中药复方提取物的具体组分含量如下:所述金银花提取物是按照如下步骤制得的:A1:将金银花充分粉碎,过100目筛,得到金银花粉末;A2:将金银花粉末加入到10倍重量的去离子水中,在85℃下搅拌浸提40‑50分钟,过滤,得浸提液;A3:将浸提液浓缩至原体积的1/8,得到浓缩液;向浓缩液中加入等体积的石油醚,充分振荡萃取,分离出石油醚相和水相;向水相中加入2倍体积的正己烷,充分振荡萃取,分离出正己烷相和水相;将正己烷相减压浓缩完全,得到残留物,并溶解在适量的乙醇中,得到乙醇液;A4:将乙醇液上300‑400目的硅胶柱,以体积比为1:3的C1‑3醇与乙醚的混合液为淋洗液,收集洗脱液,真空浓缩,将所得粘稠残留物冷冻干燥,研磨,过200目筛,即得所述金银花提取物;所述蒲公英提取物是按照如下步骤制得的:B1:将蒲公英粉末加入到乙醇中,再通入CO2,密封,使CO2压力为5‑5.5MPa,形成膨胀溶剂体系,并升温至55℃,在该温度下搅拌提取40‑50分钟;最后泻压至常压,并自然冷却至室温,过滤,得到滤液;B2:将滤液减压浓缩完全,得到浸膏;将浸膏用适量乙醇溶解,并上300目的氧化铝柱色谱,先用为柱体积3倍体积的丙酮冲洗,再用为柱体积1倍体积的石油醚冲洗,最后用为柱体积2倍体积的混合溶剂进行洗脱,收集所述混合溶剂的洗脱液,减压浓缩,残留物真空干燥完全,粉碎,过100目筛,即得所述蒲公英提取物;所述大青叶提取物是按照如下步骤制得的:C1:将大青叶粉碎成粉末,并在质量百分比浓度为5%的NaHCO3水溶液中,于45‑50℃下浸泡2‑3小时,然后过滤,并用去离子水冲洗过滤后所得的粉末,最后充分干燥,得到处理后粉末;C2:将处理后粉末加入到乙醇与水的混合溶剂中,在索氏抽提仪中于回流下抽提50‑60分钟,结束后,自然冷却,得到抽提处理液;C3:向抽提处理液中加入等体积的石油醚,充分振荡萃取,分层,得有机层和水层,分离出有机层I;将水层再次用等体积的乙酸乙酯充分萃取,分离出有机层II;最后将有机层II减压浓缩,得到粘稠残留物,将其充分干燥,研磨过100目筛,即得所述大青叶提取物;所述板蓝根提取物是按照如下步骤制得的:D1:将充分干燥的板蓝根粉碎后过100目筛,将其加入到质量百分比浓度为30‑40%的乙醇水溶液中,滴入盐酸使体系的pH值为5.8‑6.2,然后于超声装置中以0.5W/cm的功率密度提取20‑30分钟,结束后,离心分离,分出上清液;D2:将上清液减压浓缩完全,得膏状物,将其用适量乙醇溶解,上D101大孔树脂,以质量百分比浓度为70%的乙醇水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,干燥,粉碎并研磨过100目筛,即得所述板蓝根提取物;所述赤勺提取物是按照如下步骤制得的:E1:将粉末状赤勺加入到10重量倍的去离子水中,煎煮60‑80分钟,过滤,将得到的滤液用乙醚振荡萃取,分出有机层,减压浓缩完全,得到残留物;E2:将残留物用适量乙醇溶解,上300‑400目的硅胶柱色谱,分别用均为2倍柱体积的质量百分比浓度为70%的乙醇水溶液、质量百分比浓度为30%的乙醇水溶液和质量百分比浓度为50%的乙醇水溶液进行冲洗,收集质量百分比浓度为50%的乙醇水溶液的洗脱组分,减压浓缩至无醇味为止,将得到的残留物干燥、粉碎,研磨过100目筛,即得所述赤勺提取物;所述秦艽提取物是按照如下步骤制得的:F1:称取干燥完全的秦艽,粉碎研磨,过100目筛,得到秦艽粉末;F2:将秦艽粉末加入到20倍重量的质量百分比浓度为75%的乙醇水溶液中,加热回流提取40‑50分钟,趁热过滤,得滤液;F3:将滤液加入到等体积的乙酸乙酯中,振荡萃取,静置分层,分出有机乙酸乙酯相和水相;F4:将水相加入到等体积的四氯化碳中,充分振荡、萃取,分离出四氯化碳相,将其减压浓缩完全,所得粘稠膏状物冷冻干燥,研磨,过200目筛,即得所述秦艽提取物;所述荆芥提取物是按照如下步骤制得的:G1:将荆芥加入到无水乙醇中,使用200W的微波功率在60℃下微波提取60‑70分钟,然后过滤,将滤液浓缩完全得到膏状物;G2:将300‑400目硅胶用四氯化碳浸泡,直至其完全溶胀,然后装柱,并沉积过夜,得到硅胶柱;G3:将所述膏状物用适量无水乙醇溶解,得到溶解液,并上所述硅胶柱;G4:以体积比为1:1.5:2的乙酸乙酯、丙酮和石油醚的混合物进行洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,将所得残留物充分干燥,研磨,过100目筛,即得所述荆芥提取物;所述淡竹叶提取物是按照如下步骤制得的:H1:将淡竹叶粉碎,得到粉末;H2:将粉末用质量百分浓度为50%的乙醇水溶液回流提取50‑60分钟,自然冷却,过滤,得到滤液;H3:向滤液中加入等体积的丙酮,充分振荡萃取,分离,得有机相I和无机相,将无机相用等体积的乙酸乙酯充分振荡萃取,再次分离,得到有机相II;合并有机相I和有机相II,并减压浓缩完全,残留物充分干燥,研磨过100目筛,即得所述淡竹叶提取物。
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