[发明专利]一种密毛小花苣苔组培叶片两步成苗方法

摘要

一种密毛小花苣苔叶片组培两步成苗方法：取密毛小花苣苔幼嫩叶片作为外植体进行灭菌处理，将其切分成含主脉0.5 cm×1 cm大小后接种到诱导及分化培养基上，1~1.5个月后选择幼嫩叶片上分化出2片以上叶子、高2~3cm的不定芽苗转接到壮苗生根培养基上，1~2个月后无菌苗每株生根4条以上、根长2.5~5ｃｍ，生根率达98.4%。采用本发明所述方法得到的种苗健壮、成活率高，可在短期内提供大量密毛小花苣苔的优质种苗，并减少了配制培养基和转瓶的步骤，节约了大量人力物力，因此简单易行、生产成本降低，有效解决了密毛小花苣苔规模化育苗及种质资源保存问题。

主权项

一种密毛小花苣苔叶片组培两步成苗方法，其特征在于：（1）叶片诱导分化不定芽培养：取密毛小花苣苔幼嫩叶片，在75%乙醇中表面消毒30~ 45 s，无菌水2~3次，投入0.1% Hcl₂ 5 min, 无菌水2~3次，0.1% Hcl₂ 3min，无菌水2~3次冲洗干后切分为含主脉0.5 cm×1 cm大小接种在诱导及分化培养基上，在温度为22~ 26°C，光照强度1800~ 2600 lux，光照时间为8~10小时/天的条件下，10~15天叶片分化出不定芽；（2）不定芽壮苗生根培养：选择密毛小花苣苔叶片分化1 ~1.5个月，幼嫩叶片上分化出具有2片以上叶子、高2~ 3 cm不定芽接种到壮苗生根培养基，在温度为22~ 26 °C，光照强度2000~ 2800 lux，光照时间为8~10小时/天的条件下进行培养，1~2个月不定芽长至高3~6cm的无菌苗, 平均生根4条以上、根长2.5~ 5ｃｍ，生根率达98.4%。