[发明专利]一种还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子

摘要

本发明属于生物医用材料及药物控制释放领域，具体涉及一种还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子。本发明首先通过化学法和物理法制备高负载药物的壳聚糖基纳米胶束作为核层，然后制备组氨酸和半胱胺修饰的透明质酸分子作为壳层，核层与壳层通过静电作用形成核壳结构，得到还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子。本发明制备的载药纳米粒子具有主动靶向癌细胞、载药量高、在血液中稳定性好、在癌细胞内可通过还原/透明质酸酶/pH多重刺激响应快速释放药物等特性，可有效杀死癌细胞，对癌症治疗有重要意义。

主权项

1.一种还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备方法，其特征在于包含以下步骤：(1)核层壳聚糖基高载药纳米胶束的制备①将含有反应活性羟基的疏水性抗癌药物、丁二酸酐溶解于有机溶剂中，加入三乙胺进行酯化反应，反应结束后去除未反应的化合物并干燥，得到丁二酸酐改性药物；②将步骤①中制得的丁二酸酐改性药物溶于有机溶剂中，加入EDC·HCl和NHS对丁二酸酐化药物分子上的羧基进行活化反应；然后加入含有壳聚糖的MES缓冲液，使药物分子的活化羧基与壳聚糖的氨基进行酰胺化反应，反应结束后透析、干燥，得到双亲性的壳聚糖基药物衍生物；③将步骤②中得到的壳聚糖基药物衍生物溶于盐酸/有机溶剂混合溶剂中，然后在超声条件下缓慢滴加含有反应活性羟基的疏水性抗癌药物的有机溶剂，形成纳米胶束，滴加结束后搅拌使载药完全，然后透析、干燥，得到壳聚糖基高载药纳米胶束；(2)壳层透明质酸分子的组氨酸和半胱胺修饰①将透明质酸溶解于磷酸盐缓冲液中，加入EDC·HCl和NHS对羧基进行活化反应，然后加入组氨酸甲酯盐酸盐进行酰胺化反应，反应结束后透析、干燥，得到His-HA；②将步骤①中制得的His-HA溶解于磷酸盐缓冲液中，加入EDC·HCl和NHS对羧基进行活化反应，然后加入半胱胺盐酸盐进行酰胺化反应，反应结束后透析、干燥，得到His-HA-Cys；(3)还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子的制备将步骤(1)中制得的壳聚糖基高载药纳米胶束分散于水中，得到纳米胶束悬浮液；将步骤(2)中制得的His-HA-Cys溶解于水中，配成溶液并在搅拌条件下缓慢滴加到纳米胶束悬浮液中；在静电相互作用下，带负电的His-HA-Cys分子在带正电的壳聚糖基高载药纳米胶束表面沉积，然后去除未反应的反应物，得到具有核壳结构的载药纳米粒子；然后通入氧气，使纳米粒子在壳层部分发生化学交联，生成二硫键，然后干燥，制得还原/酶/pH多重响应性释药的核壳结构纳米粒子。