[发明专利]55个SNP位点多色荧光复合检测的方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种55个SNP位点多色荧光复合检测的方法及试剂盒，涉及包括核酸的测定或检验方法技术领域。试剂盒包括PCR引物，DNA聚合酶，PCR缓冲液，核酸外切酶Ⅰ，虾碱性磷酸酶，延伸引物，SNaPshot反应混合液，Hi-Di甲酰胺和GeneScan^TM Size Standards-120 LIZ；PCR引物和延伸引物由55个SNP基因位点的引物组成，分别针对包含55个SNP位点的DNA片段。采用本发明可以快速、准确地获得55个SNP位点的基因分型，并通过荧光自动分型设备检测分析，对人类生物检材进行个体识别，具有很大优势和潜力，具有很高的系统效能。

主权项

55个SNP位点多色荧光复合检测的试剂盒，其包括a）扩增体系：PCR缓冲溶液、MgCl₂、dNTPs、PCR引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA，b）扩增产物纯化试剂：核酸外切酶Ⅰ、虾碱性磷酸酶，c）延伸反应试剂：延伸引物、SNaPshot反应混合液，d）延伸产物纯化试剂：虾碱性磷酸酶，e）测试试剂：Hi‑Di甲酰胺和GeneScan^TM Size Standards‑120 LIZ，其特征在于，所述PCR引物和延伸引物由55个SNP基因位点的引物组成，所述55个SNP基因位点在NCBI中SNP数据库的rs号分别为rs1109037，rs3780962，rs6591147，rs2342747，rs9951171，rs13182883，rs10092491，rs6955448，rs6444724，rs430046，rs321198，rs159606，rs560681，rs214955，rs13218440，rs9905977，rs1821380，rs279844，rs8078417，rs4606077，rs445251，rs987640，rs4530059，rs338882，rs10488710，rs6811238，rs722290，rs7041158，rs7520386，rs9866013，rs1498553，rs2270529，rs1478829，rs1523537，rs4364205，rs985492，rs12997453，rs740598，rs1736442，rs1294331，rs993934，rs10776839，rs315791，rs576261，rs2399332，rs2272998，rs7205345，rs2269355，rs1058083，rs10773760，rs464663，rs221956，rs1336071，rs1027895和位于人类牙釉质蛋白基因Amelogenin gene上的一个性别检测SNP位点，所述性别检测SNP位点在女性个体中为纯合子T/T，在男性个体中为杂合子C/T，性别检测SNP位点的5’侧翼序列为TTTTACCTTCTTCTTTCT，3’侧翼序列为TTGTAGAACTCACATTCTCAGGC。