[发明专利]基于光电化学DNA生物传感器的铅离子测定方法

摘要

本发明提供了一种基于光电化学DNA生物传感器的铅离子测定方法，将含有部分能够特异性识别Pb2+的DNA序列组装于ITO电极表面，并以Ru(bpy)2(dppz)2+作为光电化学信号探针，当Pb2+与电极表面DNA作用后，探针从DNA链中脱离，导致光电化学信号的降低，实现了检测Pb2+的光电化学检测。本发明提供的ITO电极DNA生物传感器制备简单、成本低、反应条件温和，响应速度快，检测方便，周期短，稳定性高，重现性好。此外，该光电化学传感器对Pb2+具有高选择性、高灵敏度等优点。

主权项

基于光电化学DNA生物传感器的铅离子测定方法，其特征在于，包括以下步骤：1)ITO电极的制备：将ITO玻璃电极依次用洗涤剂、丙酮、异丙醇清洗，最后用超纯水清洗并于烘箱中烘干；将浓度1～20％的SnO2纳米溶胶旋涂到ITO导电玻璃表面，待自然风干后，于50～450℃马弗炉中煅烧0.5～5h，自然冷却后切割成0.5cm×3cm玻璃片，得到修饰有SnO2的ITO电极备用；2)DNA溶液的配制：将固体DNA样品用Tris‑HClO4缓冲液溶解，置于60‑95℃水浴锅中5～10min，然后自然冷却至室温，备用；3)DNA修饰ITO电极的制备：将0.1～5mg/ml的PDDA溶液涂于步骤1)制备的修饰有SnO2的ITO电极表面，在湿度恒定条件下孵育1～12h，然后用超纯水清洗，氮气吹干；将步骤2)配制的DNA溶液用Tris‑HClO4缓冲液稀释至2μM，取适量涂于上述处理电极表面，在湿度恒定条件下孵育2～8h，用超纯水清洗、氮气吹干，得到DNA修饰ITO电极，备用；4)Pb2+的光电化学检测：将1～50μM Ru(bpy)2(dppz)2+探针溶液滴于步骤3)制备的DNA修饰ITO电极表面，孵育0.5～6h，然后用超纯水清洗，氮气吹干；然后将上述处理的DNA修饰ITO电极作为工作电极，置于5‑50mM草酸缓冲液的光电化学测定池中，以Ag/AgCl为参比电极，铂电极为对电极，形成三电极测定体系，连接电化学工作站，在473nm蓝色光照射下，进行循环伏安扫描，测定光电流强度；将不同浓度的Pb2+溶液滴于上述处理的DNA修饰ITO电极表面，孵育0.5～6h，进行循环伏安扫描，测定光电流强度，实现对Pb2+的测定。