[发明专利]一种纯化蓝靛果忍冬中多酚的方法

摘要

一种纯化蓝靛果忍冬中多酚的方法，步骤如下：蓝靛果打浆、高压均质机均质、超声波辅助乙醇提取法浸提、真空抽虑并收集滤液、旋转蒸发仪浓缩滤液、收集多酚浓缩液、大孔树脂纯化、薄层色谱法跟踪检测并收集蓝靛果多酚洗脱液、用0.45 µm有机微孔滤膜过滤多酚富集物、利用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析法再次纯化多酚富集物、减压浓缩多酚洗脱液并回收乙醇、真空冷冻干燥蓝靛果多酚、获取紫红色蓝靛果忍冬多酚成品。本发明提高了蓝靛果资源的商用价值，所选大孔树脂具有理化性质稳定、吸附选择性好、吸附容量大效果好、解吸条件温和、再生简单等优点，适合蓝靛果多酚的规模化生产，操作工艺安全可靠，无污染，成本低廉，提取和纯化效率较高。

主权项

一种纯化蓝靛果忍冬中多酚的方法，其特征在于具体操作步骤如下：（1）挑选出采摘后的蓝靛果忍冬中无病虫害和机械损伤且成熟度一致的果实，清洗沥干后，采用匀浆机打浆，并通过高压均质机对蓝靛果果浆均质5 min，然后加入比例为40～55: 0.1: 59.9～44.9（v/v/v）的乙醇‑乙酸‑水溶液，按照料液比为1：15～25（g/mL）的比例进行混合，待混合均匀后置于35～50 ℃超声波清洗机中浸提75～100 min，对所得浸提液进行真空抽虑并收集滤液；（2）将蓝靛果多酚滤液置于圆底烧瓶中并在35～40 ℃条件下的真空旋转蒸发仪中处理30～35 min，回收乙醇并收集多酚浓缩液；（3）对收集的多酚浓缩液再次真空抽虑，并通过比较分析型号分别为XAD‑7、X‑5、S‑8、D101、AB‑8、D1400的大孔树脂对多酚滤液的吸附量、吸附率和解吸率，从中筛选出纯化蓝靛果忍冬多酚的最适大孔树脂；（4）用恒流泵将浓度为2.03 mg/mL的浓缩滤液以0.5～2 BV/h的流速进行上样，上样量为树脂体积的1.5～2.5倍，至大孔树脂呈吸附饱和状态；先用洗脱体积为2.5～4 BV的蒸馏水冲洗柱子，清除蓝靛果多酚中多糖、蛋白质杂质，接着用4倍柱体积的65～95% (v/v)的乙醇洗脱液控制洗脱流速为1～2 BV/h进行梯度洗脱，并用薄层色谱法跟踪和检测，收集蓝靛果多酚富集物；（5）收集蓝靛果多酚富集物并用0.45 µm有机微孔滤膜过滤，然后将多酚富集物经Sephadex LH‑20葡聚糖凝胶柱吸附饱和后进行二次纯化，用4～5 BV的乙醇‑乙酸‑水溶液进行洗脱，乙醇‑乙酸‑水溶液的三者比例70: 0.01: 29.99（v/v/v），收集二次纯化的多酚洗脱液；（6）对收集到的多酚洗脱液在35～45 ℃条件下进行减压浓缩并回收乙醇，接着将多酚浓缩液置于30～40 ℃条件下的真空冷冻干燥机中进行干燥处理，制成蓝靛果多酚精制品粉末，呈紫红色。