[发明专利]一种基于双色时间分辨荧光标记‑磁分离适配体识别同时检测两种致病菌的方法

摘要

一种基于双色时间分辨荧光标记‑磁分离适配体识别同时检测两种致病菌的方法，用于牛奶及乳制品中鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的检测。通过将该两种菌适配体分别与NaYF4Ce/Tb和NaGdF4Eu时间荧光分辨纳米材料偶联形成信号探针，同时该两种适配体与Fe3O4磁性纳米材料偶联形成捕获探针，当存在目标物质时，由于适配体对目标物质的特异性识别，最终形成“三明治”夹心复合物。通过监控544nm和615nm处荧光信号强度，能够定量检测鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌，两者的线性范围分别为102‑105cfu ml‑1和102‑105cfu ml‑1最低检测限分别为15cfu ml‑1和20cfu ml‑1。本发明用于同时检测两种致病菌具有灵敏度高、快速简便的优点。并应用于牛奶及乳制品的检测，结果准确可靠。

主权项

一种基于双色时间分辨荧光标记‑磁分离适配体识别同时检测两种致病菌的方法，其特征在于：将两种致病菌即鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌适配体分别与NaYF4:Ce/Tb和NaGdF4:Eu时间荧光分辨纳米材料偶联形成信号探针，同时鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌适配体与Fe3O4磁性纳米材料偶联形成捕获探针，当存在鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌时，由于适配体对目标物质的特异性识别，最终形成磁性材料‑适配体‑菌体‑适配体‑时间分辨荧光纳米材料“三明治”夹心复合物。在酶标仪的时间分辨荧光模式下，以273nm进行激发，记录544nm和615nm处荧光信号强度，实现对不同浓度的鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的检测，建立标准曲线，达到对含鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌样品进行定量检测。