[发明专利]一种鉴别检测II类新城疫病毒强弱毒的焦磷酸测序方法在审
| 申请号： | 201610118024.6 | 申请日： | 2016-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN105986045A | 公开（公告）日： | 2016-10-05 |
| 发明（设计）人： | 王静静;刘华雷;吕艳 | 申请（专利权）人： | 中国动物卫生与流行病学中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266032 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明属于动物病原检测技术领域，涉及一种鉴别检测II类新城疫病毒强弱毒的焦磷酸测序方法，先设计可区分所有II类新城疫病毒强毒株与弱毒株的特异性RT-PCR扩增引物和焦磷酸测序引物；再提取待测样品RNA，用RT-PCR扩增引物进行扩增；通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，若扩增产物长度为218bp，则制备焦磷酸测序单链模板，进行焦磷酸测序反应，最后根据RT-PCR扩增结果和焦磷酸测序结果来判定样品中是否含有II类新城疫病毒强毒株或弱毒株；本发明应用焦磷酸测序技术，通过特定序列测定实现II类新城疫病毒强弱毒鉴定，具有高通量、低成本等特点，且所需样品量小、操作简便、结果判定标准简单，满足进行早期确诊的目的，在疫情监测、快速诊断和出入境检验检疫中具有广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 检测 ii 新城 疫病 强弱 磷酸 方法 | ||
【主权项】：
一种鉴别检测II类新城疫病毒强弱毒的焦磷酸测序方法，其特征在于先进行引物设计，设计区分II类新城疫病毒强毒株与弱毒株的特异性引物及焦磷酸测序引物，再提取待测样品核糖核酸（RNA），用特异性引物进行逆转录‑聚合酶链式反应（RT‑PCR），通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，若特异性引物扩增片段长度为218bp，则制备焦磷酸测序单链模板，进行焦磷酸测序反应，最后根据RT‑PCR扩增结果和焦磷酸测序结果判定样品中是否含有II类新城疫病毒强毒株或弱毒株。
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