[发明专利]牙髓干细胞、制备方法及其相关骨组织工程材料

摘要

本发明属于医药生物领域，具体涉及一种牙髓干细胞、制备方法及其相关骨组织工程材料。牙髓干细胞的制备方法如下：取牙髓组织，剪碎后加入组织消化液，37℃，200rpm消化10‑20min，无血清培养基终止消化，吹打离散细胞团块获得单个离散的细胞，2000rpm离心5min，弃上清，无血清培养基清洗两次，再加入无血清培养基重悬细胞并调整细胞密度至1×10³个/ml，于37℃、湿度为95％的二氧化碳培养箱中培养，当细胞生长至80％‑90％融合时，用分离消化液消化细胞后用无血清培养基传代培养。

主权项

1.一种牙髓干细胞的制备方法，具体步骤如下：取牙髓组织，剪碎后加入组织消化液，37℃，200rpm消化10‑20min，无血清培养基终止消化，吹打离散细胞团块获得单个离散的细胞，2000rpm离心5min，弃上清，无血清培养基清洗两次，再加入无血清培养基重悬细胞并调整细胞密度至1×10³个/ml，于37℃、湿度为95％的二氧化碳培养箱中培养，当细胞生长至80％‑90％融合时，用分离消化液消化细胞后用无血清培养基传代培养；所述组织消化液为含1g/L胰酶和0.5g/L木瓜蛋白酶的D‑Hanks液，pH值为7.4，所述组织消化液与牙髓组织的体积重量比为10～16ml：1g；所述分离消化液为含1g/L胰酶的D‑Hanks液，pH值为7.4；所述无血清培养基为含IGF 1‑10ug/L，神经肽Y 1‑20ng/L，异荭草素1‑20ug/L，连翘苷1‑20ug/L和地塞米松1‑20mM的MEM培养基。