[发明专利]一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法

摘要

本发明公开了一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，包括以下主要步骤：将新鲜的水产蛋白绞碎；绞碎后的水产蛋白加入到发酵罐中，并添加营养物和水混匀作为发酵培养基；发酵罐中接入能产耐高温蛋白酶的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）HL-3于55℃～60℃进行好氧发酵42h～48h；发酵结束后，发酵液先后经过滤、超滤和纳滤后得到浓缩液，浓缩液经冷冻干燥后得到活性肽成品。本发明技术无需高温处理，更多地保留了制备的功能肽和水产蛋白本身所含功能性成分的生物学活性，并且简化了活性肽的制备工序和降低了活性肽的生产成本，有着良好的应用前景。

主权项

一种利用水产蛋白高温发酵制备活性肽的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：（1）将斜面保藏的能产耐高温蛋白酶的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）HL‑3接入到灭菌后冷却的LB液体培养基中，于55 ℃、150r/min培养12h，制备成地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）HL‑3种子液备用；（2）将新鲜的水产蛋白绞碎后备用；（3）将步骤（2）制得的绞碎的水产蛋白放入到发酵罐中，并向发酵罐中加入水和营养物，混匀后得到发酵培养基；（4）往步骤（3）获得的发酵培养上接入步骤（1）所制备的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）HL‑3种子液；（5）液态发酵过程的控制：发酵温度为55℃～60℃，无菌空气通入量为0.5vvm～2.5vvm，发酵罐的转速为150rpm～350rpm，发酵时间为42h～48h；（6）成品处理：将步骤（5）得到的发酵液进行过滤去除沉淀而得到上清液；上清液通过截留分子量为5000道尔顿的超滤膜的超滤去除大分子蛋白质而得到透过液；透过液然后通过截留分子量为200道尔顿的纳滤膜的纳滤去除氨基酸而得到浓缩液；浓缩液经过冷冻干燥而制备得到活性肽成品。