[发明专利]一种基于Fe2O3纳米粒子的病毒快速检测方法

摘要

一种基于Fe₂O₃纳米粒子的病毒检测方法，属于食品安全快速检测技术领域。本发明依赖于建立的可以用于食品液体样品中病毒的核磁共振检测方法，利用Fe₂O₃纳米粒子制备免疫磁珠针对性地富集病毒，通过分离捕获了病毒的纳米磁珠，再硝化反应使之转化为铁离子，检验铁离子从而间接检测出样品中是否含有目标病毒。在一定条件下铁离子的量与病毒显示出线性关系，在一定范围能够定量检测病毒。该方法可以用于样品中病毒的快速检测，从而可以作为大批待检样品的快速筛选。

主权项

一种基于Fe₂O₃纳米粒子的病毒快速检测方法，其特征是步骤如下：（1）检测病毒的特异性免疫磁珠的制备；（2）将病毒单克隆抗体在酶标板上的固定；（3）免疫磁珠富集病毒，并分离：将步骤（1）制得的免疫磁珠加入待检样品，充分混合震荡，抓取病毒后通过施加外加磁场，则磁珠就汇集到磁场一边，吸走上清液则可以分离出磁珠，若待检样品中有病毒，则被磁珠所富集，加少量无菌的去离子水则形成病毒的磁珠悬浊液；（4）将富集的磁珠悬浊液加到步骤（2）步固定了单克隆抗体的酶标板上，若存在病毒则形成双抗夹心，用无菌的去离子水清洗，则没有抓取到病毒的磁珠就被洗掉，若不存在病毒，则所有磁珠都被洗掉；（5）之后，用洗脱剂将酶标板上的双抗夹心的磁珠洗下来，用外加磁场分离磁珠的方法用无菌的去离子水清洗掉离子和溶剂，如果还存在磁珠就是抓到病毒的磁珠；（6）这部分磁珠，加入分析纯的硝酸和盐酸进行硝化反应，硝酸与盐酸的体积比为1:3，使磁珠Fe₂O₃转变为三价铁离子和二价铁离子；中和过量酸后采用邻二氮菲吸光光度法或硫氰酸钾比色法等检测出铁离子的量，算出磁珠的量，通过加标定量磁珠间接定量出病毒的量。