[发明专利]真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇的检测方法及检测试剂盒

摘要

本发明公开一种真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的检测方法及检测试剂盒。该方法包括：先将DONApt与单链信号探针ssDNA杂交，形成DONApt‑ssDNA杂交链；然后向其加入待测样品，当待测样品存在DON时，DONApt‑ssDNA与DON反应生成DONApt‑DON，并释放ssDNA；体系中剩余DONApt‑ssDNA杂交链经DNA扩增形成双链DNA；双链DNA在外切酶催化下水解成单核苷酸除去，而体系中ssDNA被保留；再向体系中加入银离子和还原剂，在ssDNA诱导下，银离子还原生成近红外荧光银纳米簇；最后依据近红外荧光强度与DON的量的关系，计算待测样品中的DON含量。

主权项

一种真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)脱氧雪腐镰刀菌烯醇核酸适体DONApt与单链信号探针ssDNA杂交，形成DONApt‑ssDNA杂交链；(2)向DONApt‑ssDNA杂交链体系中加入待测样品中，当待测样品中有DON时，DONApt‑ssDNA杂交链中DONApt的部分能选择性地与DON反应,生成DONApt‑DON，同时释放出单链信号探针ssDNA；(3)体系中剩余的DONApt‑ssDNA杂交链经DNA扩增，形成双链DNA，双链DNA在核酸外切酶III选择性地催化作用下水解成单核苷酸而除去，体系中单链信号探针ssDNA被保留下来；(4)制备近红外银纳米簇：向该体系中加入柠檬酸钠、银离子溶液和还原剂，单链信号探针ssDNA诱导银离子还原生成强荧光的近红外银纳米簇；(5)检测体系的近红外荧光强度，根据近红外荧光强度与DON浓度的关系计算待测样品中的DON的含量。