[发明专利]一种匍枝马尾藻无性种苗繁育的方法

摘要

本发明公开了一种匍枝马尾藻组织培养育苗的方法，属于海藻组织培养技术领域。首先将采集的野生匍枝马尾藻清洗并暂养，选择完整幼嫩侧枝用次氯酸钠消毒，以侧枝的茎或叶片为外植体诱导不定芽，培养不定芽形成再生叶片，然后利用再生叶片为外植体连续多代诱导形成大量不定芽，再将不定芽离体培养诱导假根形成完整再生苗，用于人工栽培。所述的不定芽诱导方法是：将茎或叶片的切段置于PESI培养基中，在20‑25℃，光照强度1000‑4000lx，光照∶黑暗＝8‑10∶16‑14h条件下培养7‑10天；所述的假根诱导方法是：将不定芽置于PESI培养基+0.1～0.5mg/L 6‑BA中，在24‑27℃，光照强度1500‑3000lx，光照∶黑暗＝10‑12∶14‑12h条件下培养20‑25天。本发明获得的再生叶片可以连续多代作为外植体诱导不定芽，量大且容易保存，种苗生产不受季节限制。

主权项

一种采用组织培养来大量繁育匍枝马尾藻种苗的方法，具体步骤如下：1)选取生长良好的匍枝马尾藻新鲜藻体，去除藻体表面的杂藻和附着物，再用灭菌过滤海水反复冲洗4‑6遍。将藻体置于20‑22℃，光照强度2000‑4000lx，光周期14D：10L条件下暂养。2)选取匍枝马尾藻样品中完整的幼嫩侧枝用70‑75％酒精消毒5‑10秒，然后用质量浓度0.8‑1.4％的次氯酸钠消毒处理8‑15分钟，再用灭菌过滤海水冲洗2‑4遍。将幼嫩侧枝的茎或叶片切段用镊子放入事前准备好的培养液中。3)培养7‑10天后茎或叶片切段切口处生出数簇不定芽，培养液5‑7天更换一次，培养14‑16天后不定芽形成再生叶片；以再生叶片为外植体继续诱导不定芽，连续诱导5‑6代后产生大量不定芽。4)将不定芽从切段分离，离体培养20‑25天，诱导不定芽再生出假根形成完整再生苗，为人工栽培提供大量种苗。