[发明专利]一种同时分离代谢组和脂质组组份的液相色谱分析方法及其应用

摘要

本发明涉及一种同时分离代谢组和脂质组组份的液相色谱分析方法及其应用，该方法所涉及的装置包括五个高效液相色谱输液泵、一个自动进样器、一个检测器、三个两位多通阀、一根捕集柱、两根液相色谱分析柱。其特点在于通过引入合适的捕集柱将复杂样品中的代谢组和脂质组组份分离并转移，结合后续分别针对代谢组和脂质组的平行柱分析，实现一次进样同时有效的分离代谢组和脂质组代谢物。本发明方法适用于复杂样品中代谢组和脂质组的同时分析，具有通量高、代谢物覆盖度广、普适性强、操作简便、重复性好等优势。

主权项

1.一种同时分离代谢组和脂质组组份的液相色谱分析方法，其特征在于：采用的装置包括液相色谱泵1(1)、液相色谱泵2(14)、稀释液泵(27)、自动进样器(2)、液相色谱柱1(12)、液相色谱柱2(13)、捕集柱(26)、十通阀(25)、八通阀(11)、六通阀(34)、和检测器(35)；主要包括代谢组组份转移、代谢组组份分离、脂质组组份分离三个过程；初始时，八通阀(11)的3号位与4号位相连，十通阀(25)的15号位与16号位相连，六通阀(34)的28号位与33号位相连；液相色谱泵1(1)的输出端经过自动进样器(2)与八通阀(11)的3号位相连，八通阀(11)的4号位通过管线与十通阀(25)的15号位相连，十通阀(25)的16号位与捕集柱(26)的输入端相连，捕集柱(26)的输出端与十通阀(25)的19号位相连，十通阀(25)的20号位通过管线与八通阀(11)的9号位相连，八通阀(11)的10号位与液相色谱柱1(12)的输入端相连，液相色谱柱1(12)的输出端与六通阀(34)的28号位相连，六通阀(34)的33号位与检测器相连；液相色谱泵2(14)与八通阀(11)的5号位相连，八通阀(11)的6号位和7号位通过管线相连，8号位与色谱柱2(13)的输入端相连，色谱柱2(13)的输出端与六通阀(34)的32号位相连，六通阀(34)的30号位与31号位通过管线相连，29号位接入废液；在该位置，自动进样器(2)将复杂样品提取液进样到捕集柱(26)，样品中的代谢组组份首先流出并转移至液相色谱柱1(12)中；待代谢组组份从捕集柱(26)完全流出后，控制十通阀(25)切换，液相色谱泵1(1)的输出端经过自动进样器(2)与八通阀(11)的3号位相连，八通阀(11)的4号位通过管线与十通阀(25)的15号位相连，十通阀(25)的24号位通过管线与21号位相连，十通阀(25)的20号位通过管线与八通阀(11)的9号位相连，八通阀(11)的10号位与液相色谱柱1(12)的输入端相连，液相色谱柱1(12)的输出端与六通阀(34)的28号位相连，六通阀(34)的33号位与检测器(35)相连；液相色谱泵2(14)控制输出的流动相流路不变；十通阀(25)的22号位和23号位堵死；在该位置实现代谢组组份在液相色谱柱1(12)中的分离以及液相色谱柱2(13)的平衡；待代谢组组份在液相色谱柱1(12)中分离完成后，控制十通阀(25)、八通阀(11)、和六通阀(34)同时切换，液相色谱泵1(1)的输出端经过自动进样器(2)与八通阀(11)的3号位相连，八通阀(11)的10号位与液相色谱柱1(12)的输入端相连，液相色谱柱1(12)的输出端与六通阀(34)的28号位相连，六通阀(34)的29号位接入废液；液相色谱泵2(14)与八通阀(11)的5号位相连，八通阀(11)的4号位通过管线与十通阀(25)的15号位相连，十通阀(25)的16号位与捕集柱(26)的输入端相连，捕集柱(26)的输出端与十通阀(25)的19号位相连，十通阀(25)的20号位通过管线与八通阀(11)的9号位相连，八通阀(11)的8号位与液相色谱柱2(13)的输入端相连，液相色谱柱2(13)的输出端与六通阀(34)的32号位相连，六通阀(34)的33号位与检测器(35)相连；在该位置，捕集柱(26)中的脂质组组份转移到液相色谱柱2(13)中并进行分离；与此同时，完成液相色谱柱1(12)的平衡；待脂质组组份分离完成后，控制十通阀(25)切换；稀释液泵(27)与十通阀(25)的17号位相连，十通阀(25)的16号位与捕集柱(26)的输入端相连，捕集柱(26)的输出端与十通阀(25)的19号位相连，十通阀(25)的18号位接入废液；在该位置，实现捕集柱(26)中残留溶剂的替换；所述的代谢组组份包含所有除脂类以外的小分子代谢物和溶血磷脂类代谢物；脂质组组份包括除溶血磷脂类外的其他脂类代谢物。