[发明专利]一种催化黄酮类化合物葡萄糖苷化的基因工程菌及其应用

摘要

本发明公开了一种催化黄酮苷元葡萄糖苷化的基因工程菌及其应用,具体而言，本发明敲除了底盘生物细胞的β‑葡萄糖苷水解酶基因，降低糖苷化产物的内源性降解；然后对底盘生物细胞参与糖基供体尿苷二磷酸葡萄糖(UDP‑Glu)合成的2个关键酶磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGP1)基因进行高表达调节，再组合表达一个具有催化黄酮苷元葡萄糖苷化的尿苷二磷酸葡萄糖转移酶基因，从而获得了具有高效地催化黄酮化合物葡萄糖苷化的基因工程菌株，最终在10升发酵罐内以野黄芩素为催化底物发酵54小时，糖苷化产物野黄芩素‑7‑O‑葡萄糖的产量达到1200mg/L。本发明采用的策略为微生物法生物催化化学小分子糖苷化提供了一种技术借鉴。

主权项

一种能够催化黄酮类化合物葡萄糖苷化的基因工程菌，其特征在于，所述的基因工程菌，其制备方法如下：i)敲除宿主菌内源性的葡萄糖苷水解酶基因；ii)提高宿主菌中的磷酸葡萄糖变位酶的表达，进而提高催化效率；iii)提高宿主菌中的尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶的表达，进而提高催化效率；iv)在宿主菌内转入尿苷二磷酸葡萄糖转移酶基因，并使其高表达；以上所述的i)、ii)、iii)、iv)可以以任意顺序操作完成。