[发明专利]一种利用多个标记基因对梨黑斑病菌进行种级分类的方法有效
| 申请号： | 201610149853.0 | 申请日： | 2016-03-16 |
| 公开（公告）号： | CN105543407B | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 朱红艳;秦仲麒;张晓旭;伍涛;李先明;涂俊凡;杨夫臣;刘政;朱婷 | 申请（专利权）人： | 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 杨采良 |
| 地址： | 430064 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用多个标记基因对梨黑斑病菌进行种级分类的方法，包括以下步骤：(1)利用标记基因LEU/GPD、HIS的特异引物对待测菌株进行PCR扩增；(2)扩增产物连接PUC19‑vector，再测序；(3)利用MEGA软件对LEU/GPD+HIS综合序列进行系统分析，从而对不同梨黑斑病菌菌株进行分类。此鉴定方法可准确快速的对梨黑斑病菌进行种分类。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 标记 基因 黑斑 病菌 进行 分类 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用多个标记基因对梨黑斑病菌进行种级分类的方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步，以LEU/GPD、HIS特异引物进行PCR扩增，扩增产物连接PUC19载体，挑取单克隆测序。第二步LEU/GPD、HIS扩增产物序列拼接，第三步，以MEGA5.0对序列进行分析，根据聚类结果，明确待测菌株的种类；所述特异引物序列分别为：HIS3‑F如SEQ:ID:NO:1所示，HIS3–R如SEQ:ID:NO:2所示，LEU‑F如SEQ:ID:NO:3所示，LEU‑R如SEQ:ID:NO:4所示，GPD‑F如SEQ:ID:NO:5所示，GPD‑R如SEQ:ID:NO:6所示。
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