[发明专利]一种利用水稻秸秆生产生物柴油的新方法

摘要

本发明公开了一种利用水稻秸秆生产生物柴油的新方法，包括如下步骤木霉、米曲霉和黄孢原毛平革菌以90∶8∶2的比例混合进行固态发酵，28‑30℃，不控湿封闭式静止发酵4天，将水稻秸秆转化为各种小分子糖类；然后通过发酵丝孢酵母在25‑28℃利用上述秸秆水解液为原料发酵生产多不饱和脂肪酸；最后利用构建的具有脂肪酸乙酯(即生物柴油)合成能力的大肠杆菌同源重组菌，采用上述制备的水稻秸秆水解液为糖液及不饱和脂肪酸为原料进行生物柴油制备。气相色谱分析表明发酵获得的生物柴油主要成分为油酸乙酯、肉豆蔻酸乙酯、棕榈酸乙酯和十六碳烯酸乙酯。生产获得的生物柴油各项指标符合国际生物柴油标准。

主权项

一种利用水稻秸秆生产生物柴油的新方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、木霉、米曲霉和黄孢原毛平革菌以90∶8∶2的比例混合，以水稻秸秆为底物，28‑30℃，不控湿，封闭式静止发酵4天，得到水稻秸秆水解液；S2、以水稻秸秆水解液为底物，利用发酵丝孢酵母进行液态发酵，25‑28℃发酵8天，pH为6.5，得到以多不饱和脂肪酸为成分的微生物油脂。S3、以构建的具有脂肪酸乙酯合成能力的大肠杆菌同源重组菌为发酵菌株，采用S1制备的水稻秸秆水解液为糖液及S2得到的微生物油脂为脂肪酸来源进行生物柴油制备。原料成分为水稻秸秆水解液(糖量)4％，微生物油脂1％，蛋白胨1％，酵母膏0.5％，氯化钠1％，pH为7.0。在37℃下培养5小时后，加入0.1mM IPTG，不通气，搅拌速度为100r/min，发酵培养48小时。