[发明专利]一种抗TNF-α类单克隆抗体的层析方法有效

专利信息
申请号: 201610158762.3 申请日: 2016-03-18
公开(公告)号: CN105837687B 公开(公告)日: 2019-08-16
发明(设计)人: 杨辉;马旭通;杨彬;孙文正;李文佳;苏彦景 申请(专利权)人: 广东东阳光药业有限公司
主分类号: C07K16/24 分类号: C07K16/24;C07K1/18;C07K1/20
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 523808 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明涉及一种抗TNF‑α类单克隆抗体的层析方法,属于生物技术领域。具体公开了一种TNF‑α类单抗纯化过程中去除宿主蛋白及多聚体的方法。采用离子交换与疏水复合层析的填料,使用低pH缓冲液清除污染物,然后使用更低pH洗脱缓冲液来洗脱目的抗体。本发明的技术方案,能去除一部分多聚体和大部分宿主蛋白,显著提高抗体纯度,价格更便宜且无proteinA脱落,简单方便,无需调节样品pH值与电导,适合于工艺放大及工业生产。
搜索关键词: 一种 tnf 单克隆抗体 层析 方法
【主权项】:
1.一种抗TNF‑α类单克隆抗体的层析方法,包括以下步骤:1)将抗TNF‑α类单抗组合物加载到复合层析材料上;2)用pH7.0~7.4的第一清洗缓冲液清洗所述复合层析材料;3)用pH低于第一清洗缓冲液的第二清洗缓冲液清洗所述复合层析材料;4)用pH低于第二清洗缓冲液、含有7~10mM的苯丁酸钠、0.05~0.3M尿素以及1~4%体积含量乙醇的洗脱缓冲液洗脱;其中,所述的抗TNF‑α类单抗组合物pH为6.0~7.0;所述的复合层析材料为离子交换作用和疏水作用的PALL公司的MEP复合介质;所述的抗TNF‑α类单抗组合物包括一种或多种污染物,污染物包括宿主细胞蛋白;步骤2)所述的第一清洗缓冲液为50mM PBS;步骤3)所述的第二清洗缓冲液为50mM PBS;步骤4)所述的洗脱缓冲液为50mM NaAc‑HAc和150mM NaCl;所述的TNF‑α类单克隆抗体为阿达木单抗。
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