[发明专利]一种1,1’—二茂铁二甲酸/铂纳米颗粒/DNA酶复合物的制备方法及检测甲胎蛋白的方法有效
| 申请号： | 201610159851.X | 申请日： | 2016-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN105823886B | 公开（公告）日： | 2017-11-21 |
| 发明（设计）人： | 张冰;张浩春;李慧;韩兵;高文超;李兴;常宏宏;魏文珑 | 申请（专利权）人： | 太原理工大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/574;G01N27/327;B82Y30/00;B82Y40/00 |
| 代理公司： | 太原市科瑞达专利代理有限公司14101 | 代理人： | 李富元 |
| 地址： | 030024 山西*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明涉及医学肿瘤标志物检测领域，具体是一种1，1’—二茂铁二甲酸/铂纳米颗粒/DNA酶复合物制备及其检测甲胎蛋白的方法。制备1，1’—二茂铁二甲酸无限配位聚合物分散在聚乙烯亚胺（PEI）溶液中，制得Fc‑COOH/PEI复合物，制得Pt纳米颗粒。将Pt纳米颗粒与Fc‑COOH/PEI复合物通过静电作用Fc‑COOH/PEI/Pt复合物。将二抗（Ab2）和G‑quadruqlex加入上述复合物，然后加入血红素构建Hemin/G‑quadruqlex/Fc‑COOH/PEI/Pt Ab2共轭物。本发明还涉及检测甲胎蛋白的方法。本发明电化学免疫传感器具有较好的灵敏度，并且检测速度快，准确率高，检测甲胎蛋白有较好的专一性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 二茂铁二 甲酸 纳米 颗粒 dna 复合物 制备 方法 检测 蛋白 | ||
【主权项】：
一种1,1’—二茂铁二甲酸/铂纳米颗粒/DNA酶复合物的制备方法，其特征在于按照如下的步骤进行步骤一、将1,1’‑二茂铁二甲酸Fc‑COOH溶解在甲醇中，在空气中敞口放置生成无限配位聚合物ICP，将无限配位聚合物ICP分散在聚乙烯亚胺PEI溶液中，制得1,1’‑二茂铁二甲酸配位聚合物/聚乙烯亚胺复合物Fc‑COOH/PEI；步骤二、将氯铂酸钾K2PtCl6溶液加入到沸腾的去离子水中，然后将柠檬酸钠Na3C6H5O7溶液和含硼氢化钠NaBH4的柠檬酸钠溶液加入上述溶液进行磁力搅拌，将溶液冷却后，获得的沉淀物用去离子水离心洗涤三次或者以上，即制得Pt纳米颗粒；步骤三、将步骤二制备的Pt纳米颗粒与步骤一制备的1,1’‑二茂铁二甲酸配位聚合物/聚乙烯亚胺复合物Fc‑COOH/PEI混合对其进行超声处理2小时，使带有正电的Fc‑COOH/PEI复合物和带负电的Pt纳米颗粒通过静电作用生成Fc‑COOH/PEI/Pt复合物；步骤四、将二抗Ab2和四联体G‑quadruplex加入到步骤三制备的Fc‑COOH/PEI/Pt复合物中，在4℃的环境下孵育12小时，对生成产物离心，用磷酸缓冲溶液PBS清洗后，加入氯化血红素HeminC34H32ClN4O4Fe，生成物用磷酸缓冲液PBS溶液清洗多次后，离心得到的Hemin/G‑quadruplex/ Fc‑COOH/PEI/Pt Ab2共轭物即为1,1’—二茂铁二甲酸/铂纳米颗粒/DNA酶复合物。
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