[发明专利]热带木本植物组织培养工厂化育苗中细菌污染的处理方法

摘要

热带木本植物组织培养工厂化育苗中细菌污染的处理方法，包括如下步骤：选择抗生素，过滤灭菌后加入到增殖培养基中配制培养基；在培养基中培养热带木本植物的增殖苗，植株生长状态相对良好，挑选可见细菌菌落相对较少的增殖苗进行试验；在超净工作台中，使用消毒好的尖头镊子夹取1‑2cm的植株茎尖，然后转移到添加抗生素的增殖培养基中；按周期对热带木本植物的增殖苗进行多次继代培养。本发明解决工厂化育苗中难以避免的由于人工操作引起的细菌污染，短期内解除植物细菌污染的干扰，重新获得无菌的优良苗木，满足市场需求，为植物组织培养特别是热带木本植物的工厂化育苗提供技术支持，为珍贵材料的保存方法和方式提供新的途径和技术方法。

主权项

 热带木本植物组织培养工厂化育苗中细菌污染的处理方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、培养基的配制选择具有广谱抗菌效果的头孢噻肟钠、特美汀作为抑菌的抗生素，过滤灭菌后加入到增殖培养基中；S2、增殖苗的选取在增殖培养基中培养不超过20天或30天的热带木本植物的增殖苗，植株生长状态相对良好，挑选肉眼可见细菌菌落相对较少的增殖苗进行试验；S3、增殖苗的转接与培养在超净工作台中，挑选细菌污染较少即肉眼看到存在较少菌落的增殖苗，使用消毒好的尖头镊子夹取1‑2cm的植株茎尖，然后转移到添加抗生素的增殖培养基中，夹取茎尖时镊子勿接触到培养基或瓶壁；S4、增殖苗的抑菌处理将带菌苗转移到带有抗生素的培养基中，按周期对热带木本植物的增殖苗进行S3中的操作，即进行多次继代培养，在无肉眼可见细菌污染时，继续在添加抗生素的培养基中进行2‑3次的连续转接，控制培养条件为温度25±1℃,光照时间12‑14h,光照强度为2500‑3000lx，处理3‑6次；S5、除菌效果的检测对多次抑菌处理后在抗生素培养基中培养的芽苗进行观察，将无细菌菌落出现的增殖苗转移到增殖或生根培养基中进行培养，20天或30天后检测是否有细菌长出以及细菌污染的比例。