[发明专利]一种不同脉冲序列对水峰进行压制的研究方法

摘要

本发明公开了一种不同脉冲序列对水峰进行压制的研究方法，包括采集不同年龄段的男性尿液并进行分析，将采集到的尿液样品经离心、加缓冲溶液、内标物、静置、再离心进行处理后，准备进行NMR测试，用不同的脉冲序列对尿液水峰进行压制，以比较各种脉冲序列对水峰的压制效果，优化制谱的效果和参数的设置；然后对采集的NMR数据进行处理，最后进行分析和讨论，以得到每种脉冲序列最佳的参数设置。本发明采用不同的脉冲序列对水峰进行压制，得到好的制谱效果，对于代谢产物的分析有很大的益处。

主权项

一种不同脉冲序列对水峰进行压制的研究方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）样本的采集：选择不同年龄段的男性的尿液进行分析，年龄段的范围从14～36岁的男性，为了增加数据的可靠性，每个年龄段的样本取两个； （2）样品的处理：采集到的尿液样品于3～5℃，6000～8000 r/min条件下离心8～12min以去除固体杂质，从每份尿液中取上层清液，加磷酸盐/D₂O缓冲溶液，磷酸盐/D₂O缓冲溶液的浓度为0.2mol/L，pH为7.3～7.5，并加摩尔浓度为0.9～1.1×10⁻³ mol/L的2,2,3,3‑三甲基甲硅烷基丙酸为内标物，样品静置8～12min，再于3～5℃，6000～8000 r/min离心8～12min，取上层清液置于核磁管中，准备进行NMR测试；（3）NMR数据的采集：利用超导傅里叶变换核磁共振谱仪（400M)，用不同的脉冲序列对尿液水峰进行压制，以比较各种脉冲序列对水峰的压制效果，优化制谱的效果和参数的设置；（4）NMR数据的处理：尿液样品¹H NMR谱以2,2,3,3‑三甲基甲硅烷基丙酸为化学位移参考峰的位置，设为δ0，相位和基线调整后将氢谱的δ0.2～9.8区域进行分段积分，每段为0.04；去除水峰附近的区域δ4.2～5.2，将积分数据归一化，以文本文件或Excel文件贮存，用于随后的主成分分析；（5）数据分析和讨论：通过对得到的图谱进行分析，比较水峰压制的情况和水峰附近的峰是否受到压制、相位的调整情况、基线的平整程度，分别对几种脉冲序列压水峰的效果进行比较，以得到每种脉冲序列最佳的参数设置。