[发明专利]反转录反应液及制备cDNA的方法有效
申请号: | 201610176594.0 | 申请日: | 2016-03-24 |
公开(公告)号: | CN105713899B | 公开(公告)日: | 2018-09-25 |
发明(设计)人: | 张双宇;刘玉方;李晓晨;孙克非 | 申请(专利权)人: | 天根生化科技(北京)有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 李志东 |
地址: | 100192 北京市海淀区西*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提出了一种反转录反应液及其一种制备cDNA的方法。本发明所提出的反转录反应液和利用该反转录反应液制备cDNA的方法,具有操作简便、反应快速、反应效果好、可重复性高的优点。 | ||
搜索关键词: | 转录 反应 制备 cdna 方法 | ||
【主权项】:
1.一种反转录反应液,其特征在于,所述反转录反应液包括:0.1~0.3摩尔/升三羟甲基氨基甲烷;40毫摩尔/升硫酸铵;6毫摩尔/升~10毫摩尔/升氯化镁;0.3摩尔/升氯化钠;3毫摩尔/升二硫苏糖醇;100~300毫摩尔/升海藻糖;质量体积百分数为0.002%的明胶;1.6毫摩尔/升的乙二醇双四乙酸;脱氧核苷三磷酸各1~3毫摩尔/升;5~20微摩尔/升的Oligo‑dT15引物;10~30微摩尔/升的随机引物;25~75个单位/微升的鼠白血病病毒反转录酶;1.5~2.1个单位/微升的RNA酶抑制剂;1体积%甘油;以及余量的水;所述反转录反应液的pH为8.3。
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